H1N1流感病毒导致小鼠胚胎心脏肥大表型及基因筛选

摘要

先心病是人类死亡率最高的出生缺陷之一，除8-10％为家族遗传性的先心病外，其余为散发先心病。遗传和环境因素相互作用是导致先心病重要原因，其中环境因素主要包括药物、环境污染、宫内感染等。流感病毒作为宫内感染的环境因素之一，一直颇受关注。
　　已有研究报道H1N1片段蛋白能与宿主细胞多种功能蛋白相互作用，进而影响宿主及病毒蛋白在翻译水平上的表达。为探究H1N1流感病毒导致新生小鼠心脏异常情况，本研究利用SPF级昆明白小鼠，对怀孕7.5天小鼠进行流感病毒感染。结果显示，新生小鼠心脏的石蜡切片出现了心肌肥大现象，并进一步通过解剖拍照、计算心重体重比等方法，证实了H1N1会引起胚胎发育阶段心肌肥大。为了深入探讨其分子机制，本项目在胚胎发育的11.5天，利用全基因转录组高通量测序及生物信息学分析筛选得到上调基因25个，下调基因2个，其中camk4、grap2表达上调。本研究为H1N1导致心肌肥大提供了初步的理论依据，为进一步研究其分子机制奠定了基础。

目录

摘要

1 引言和文献综述

1．1．2 心脏发育简述

1．2 先天性心脏病简述

1．2．1 遗传因素导致先天性心脏病

1．2．2 环境因素导致先天性心脏病

1．3 流感病毒H1N1

1．3．1 流感病毒H1N1介绍

1．3．2 流感病毒致心脏发育异常

1．4 病理性心肌肥大

1．4．1 心肌肥大

1．4．2 病理性心肌肥大与生理性心肌肥大

1．4．3 病理性心肌肥大的调控机制

1．5 本研究的目的和意义

2．1．1 主要试剂

2．1．2 主要实验器材和耗材

2．1．3 主要生物信息学软件

2．1．4 病毒和实验动物

2．2 方法

2．2．1 小鼠交配

2．2．2 孕鼠麻醉攻毒及取材

2．2．3 引物设计与合成

2．2．4 病毒检测

2．2．5 石蜡包埋、切片及HE染色

2．2．6 胚胎拍照

2．28 转录组高通量测序

3 结果

3．1 H1N1引起新生小鼠心肌肥大

3．2 石蜡切片验证H1N1导致新生小鼠心肌肥大

3．3 流感病毒调控心肌肥大的机制研究

4．讨论

结语

参考文献

附录

致谢

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