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论文说明:本文所用英文缩写词表
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第1章绪论
1.1单碱基突变检测的重要性
1.2单核苷酸多态性
1.2.1单核苷酸多态性的特性
1.2.2单核苷酸多态性在生物医学中的应用
1.3单核苷酸多态性的检测方法
1.3.1以热动力学差异为基础的分子杂交技术用于SNP识别
1.3.2以酶学识别为基础的SNP检测方法
1.3.3以构象差异为基础的SNP识别
1.3.4以检测平台为基础的SNP识别方法
1.4一维微流控微珠阵列的发展
1.5本文拟开展的研究工作
第2章一维微流控微珠阵列芯片用于肿瘤细胞中基因突变的检测
2.1前言
2.2实验部分
2.2.1仪器和试剂
2.2.2实验方法
2.3结果与讨论
2.3.1一维微流控突变检测微珠阵列芯片的构建
2.3.2一维微流控微珠阵列芯片用于检测基因突变的特异性
2.3.3一维微流控微珠阵列用于检测基因突变的灵敏度及响应范围
2.3.4等位基因特异性杂交技术用于一维微流控微珠阵列芯片检测低量点突变的性能
2.3.5一维微珠阵列检测基因突变的再生性能
2.3.6一维微珠阵列以mRNA为目标检测肿瘤细胞p53基因突变
2.3.7 RT-PCR验证
2.4小结
第3章基于寡核苷酸连接反应的一维微流控微珠阵列芯片高灵敏肿瘤低量点突变检测
3.1前言
3.2实验部分
3.2.1仪器和试剂
3.2.2实验方法
3.3结果与讨论
3.3.1实验原理
3.3.2寡核苷酸连接反应应用于一维生物芯片中检测基因突变的特异性研究
3.3.3寡核苷酸连接反应应用于一维生物芯片中检测基因突变的灵敏度研究
3.3.4一维微珠阵列芯片检测三种肿瘤细胞p53基因的突变类型
3.3.5一维微流控微珠阵列芯片检测低量点突变的性能研究
3.4 小结
第4章基于Apyrase介导的等位基因特异性延伸一维微流控微珠阵列芯片用于多药耐药蛋白基因分型
4.1前言
4.2实验部分
4.2.1仪器和试剂
4.2.2实验方法
4.3结果与讨论
4.3.1实验原理
4.3.2 Apyrase介导的等位基因特异性延伸应用于一维微流控微珠阵列芯片中识别基因突变的特异性研究
4.3.3Apyrase介导的等位基因特异性延伸在一维生物芯片中的灵敏度
4.3.4一维微流控微珠阵列芯片多元检测MDR1相关的SNP
4.3.5 PCR产物的测序验证
4.4 小结
第5章一种基于碱性磷酸酶介导的等位基因特异性延伸突变识别新方法及在一维微珠阵列芯片的应用
5.1前言
5.2实验部分
5.2.1仪器和试剂
5.2.2实验方法
5.3结果与讨论
5.3.1实验原理
5.3.2碱性磷酸酶介导的等位基因特异性延伸方法的条件优化
5.3.3碱性磷酸酶(Shrimp)介导的等位基因特异性延伸应用于一维微流控微珠阵列芯片中识别基因突变的特异性研究
5.3.4碱性磷酸酶介导的等位基因特异性延伸在一维生物芯片中的灵敏度
5.3.5碱性磷酸酶介导的引物延伸方法在一维微流控微珠阵列芯片中多元检测MDR1相关的SNP
5.4 小结
第6章基于滚环放大技术的一维微流控微珠阵列芯片用于突变检测研究
6.1前言
6.2实验部分
6.2.1仪器和试剂
6.2.2实验方法
6.3结果与讨论
6.3.1实验原理
6.3.2环形DNA的制备及液相中的RCA放大
6.3.3芯片中突变检测的特异性
6.3.4芯片中突变检测的灵敏度
6.3.5芯片中肿瘤细胞p53基因突变的RCA检测
6.4 小结
结论
参考文献
附录攻读学位期间所发表的学术论文目录
致谢
湖南大学;