芳基取代噻唑和噻嗪衍生物的合成、晶体结构及其生物活性

摘要

根据神经氨酸酶NA活性位点设计的NA抑制剂具有选择性抑制A 型、B 型流感病毒的作用，是目前最有效的药物治疗。但流感病毒很易变异，目前流感病毒H1N1，H5N1 对治疗流感的神经氨酸酶抑制剂“达菲”对产生了一定的耐药性，使得研究新的NA 抑制剂非常必要。组-1 神经氨酸酶（N1，N4，N5，N8）相比组-2（N2，N3，N6，N7，N9）多出150-Cavity、430-Catity两个有效活性位点。本文根据组-1中N1 双活性位点SA/150-Cavity、150-Cavity/430-Cavity和150-Cavity/430-Cavity 与NA 抑制剂的构效关系，设计合成了一系列3-芳基噻唑基苯甲酸乙酯、4-叔丁基-5-芳基-1,3-噻嗪类和4-甲基-2-乙酰氨基-5-乙氧酰基-6-芳基苯基-1,3-噻嗪三类NA 抑制剂，并评价该三类了化合物体外对H1N1的NA 抑制活性。
　　 1）针对SA/150-Cavity双位点的NA抑制剂第二章针对双靶点SA/150-Cavity 设计合成了一系列苯甲酸乙酯类流感病毒H1N1的NA 抑制剂。以4-乙酰氨基-3-氨基苯甲酸乙酯1 为中间体，对3-位氨基为主要反应位点通过噻唑，脲基，酰胺连接针对SA活性位点的对乙酰氨基苯甲酸乙酯和针对活性位点150-cavity的取代芳基，以对H1N1的神经氨酸酶NA 起到双位点的抑制作用。
　　 A以4-氨基苯甲酸为原料经酯化，酰化，硝化，还原得到了4-乙酰氨基-3-氨基苯甲酸乙酯（1），并优化了化合物1的每一步工艺条件。在酯化反应中用微波加热代替传统电加热；在还原反应中用Pd-C 作为硝化还原的催化剂，以较高收率合成了重要中间体1。
　　 B 用噻唑环连接对SA活性位点的乙酰氨基苯甲酸乙酯和针对活性位点150-cavity的取代芳基。化合物6 与α-溴代芳基酮反应设计合成一系列4-乙酰氨基-3-芳基噻唑基-苯甲酸乙酯类化合物；讨论了不同pH值对反应的影响，发现在pH值5～9 范围内能得到目标产物，避免了苯并咪唑类化合物的合成，得到目标化合物收率71.2％～83.2％，
　　 c 用脲基连接对SA活性位点的乙酰氨基苯甲酸乙酯和针对活性位点150-cavity的取代芳基和烷基，利用化合物1 与异腈酸酯反应以69.0％～86.4％的收率合成5个4-乙酰氨基-3-取代脲基-苯甲酸乙酯类及3个4-乙酰氨基-3-（3-取代脲基）-苯甲酸化合物。
　　 D 用酰胺基连接对SA活性位点的乙酰氨基苯甲酸乙酯和针对活性位点150-cavity的取代芳基和烷基，化合物1 与酰氯反应生成5个4-乙酰氨基-3-取代酰氨基-苯甲酸乙酯化合物和5个4-乙酰氨基-3-取代酰氨基-苯甲酸化合物收率在22.8％～87.4％。
　　 2）针对150-Cavity/430-Cavity 双位点的NA 抑制剂第三章针对150-Cavity和430-Cavity活性位点设计一系列作为N1 抑制剂的1,3-噻嗪化合物和嘧啶化合物，用1,3-噻嗪和嘧啶连接针对150-Cavity 或430-Cavity的疏水基团，以达到对NA 双位点的抑制效果，对所有合成的1,3-噻嗪、嘧啶化合物进行了体外对NA的抑制活性测试，得到了具有较好体外抑制NA活性的4-叔丁基-6-芳基-2-氨基-1,3-噻嗪。以芳香醛与嚬那酮的Aldol 缩合反应产物4-叔丁基-1-（4-芳基）-1-戊基-3-酮为原料，以α,β-不饱和烯酮与硫脲反应合成10种4-叔丁基-6-芳基-2-氨基-1,3-噻嗪盐酸盐NA 抑制剂。探讨了两种Lewis 酸（BF3.Et2O，AlCl3）、三种无机酸（浓盐酸、浓硫酸、浓硝酸）以及有机酸醋酸催化α，β-不饱和烯酮与硫脲生成4-叔丁基-6-芳基-2-氨基-1,3-噻嗪盐酸盐的Biginelli反应，比较各催化剂的特点后，选择浓盐酸伪反应的催化剂，合成的10中4-叔丁基-6-芳基-2-氨基-1,3-噻嗪盐酸盐化合物收率28.2％～92.8％。
　　 化合物4-叔丁基-1-(4-氯苯基）-1-戊基-3-酮（44）,4-叔丁基-6-(4-氯苯基)-2-氨基噻嗪盐酸盐（67）结构经X-射线衍射确定，单晶X-射线衍射分析得到的分子结构与预期设计的化合物结构一致。化合物44 平面之间的距离为3.564 ?，烯酮分子是以Π-Π作用维持分子稳定性的；化合物67是一个扭曲的船式结构由原子C(1)/N(1)/C(2)/C(3)/C(4)/S(1)组成，噻嗪盐酸盐通过氢键作用达到维持分子稳定的作用。
　　 3）针对SA/430-Cavity的N1 抑制剂第四章选择研究较少的杂环1,3-噻嗪环作为N1抑制剂的主要母环，以N1活性位点SA、430-Cavity 为靶点设计合成了4-甲基-2-乙酰氨基-5-乙氧酰基-6-(芳基苯基)-1,3-噻嗪作为NA 抑制剂。在芳甲醛和乙酰乙酸乙酯生成2-(取代基亚苄基）乙酰乙酸乙酯的Knoevenagel反应中探讨了不同催化剂反应收率的影响，选定哌啶作为Knoevenagel 反应的催化剂。芳甲醛和乙酰乙酸乙酯反应以42.1％～75.8％的收率合成了2-(取代基亚苄基）乙酰乙酸乙酯，因大部分产物需要柱层析得到，故收率稍低。
　　 在合成化合物4-甲基-2-乙酰氨基-5-乙氧酰基-6-芳基苯基-1,3-噻嗪时，在反应装置上进行了改进，选择使用了分水器，将副产物水排出反应体系外，选择乙醇为溶剂，利用共沸将水及部分乙醇排除反应体系，达到完全反应的目的，从而提高了反应收率，收率66.25～
　　 89.7％，反应时间缩短到7 h 左右。
　　 4-甲基-6-(3-甲氧基苯基)-5-乙氧酰基-2-氨基-1,3-噻嗪（98）结构经X-射线衍射确定，单晶X-射线衍射分析得到的分子结构与预期设计的化合物结构一致，噻嗪环上C(3)上取代基乙氧羰基中羰基氧原子为氢的受体与和氨基上氮原子原子形成分子间氢键N－H…O，噻嗪O离子通过氢键作用与N原子上H连接从而达到维持分子稳定的作用。4）生物活性在40μg/mL两种浓度下，对新合成的化合物进行了对神经氨酸酶（NA）的体外活性测试，发现大部分化合物具有体外NA 抑制活性，在合成的针对双位点NA 抑制剂中，有部分化合物相比文献中单纯针对SA的NA 抑制剂活性要好，其中活性最好化合物71的IC50值为0.07 μmol/mL，98的IC50值为0.08 μmol/mL，为双位点的NA 抑制剂提供了研究基础。
　　 与拜耳公司合作对噻唑化合物8～25，1,3-噻嗪类化合物67～76 进行了杀虫除草杀菌活性研究，发现所选化合物无杀虫活性。化合物8～25中D 在浓度为1900 克/公顷时对菊科植物洋甘菊(MATCH)有良好的除草活性，可用于制备除草剂。化合物A及化合物H的杀菌活性较好，化合物A 对小麦颖枯病菌的ED50 为46 μg/mL，化合物H 对小麦壳针孢的ED50为28.2 μg/mL，可作为杀菌剂进行研究。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1章绪论

第2章4-乙酰氨基-3-(4-芳基噻唑-2-氨基)苯甲酸乙酯的合成与表征

第3章4-叔丁基-6-芳基-1,3-噻嗪盐酸盐的合成

第4章4-甲基-6-芳基-5-乙氧酰基-1,3-噻嗪的合成

第5章生物活性研究

结论

参考文献

附录

致谢