鹿角托盘17KD蛋白的分离纯化及性质研究

摘要

目的：比较鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白的差异，对鹿角托盘中的特异蛋白进行分离纯化，并进一步研究其理化性质及细胞活性。 方法：采用中空纤微膜技术分离提取鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白；应用SDS-PAGE法比较鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白差异；应用超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析等现代生物技术分离、纯化鹿角托盘特异蛋白；应用细胞培养技术、质谱技术等进行性质研究。 结果： 1、采用中空纤微膜分离技术，鹿茸、鹿角托盘及鹿骨的水溶性总蛋白收率分别为17.1％、8％、0.1％。 2、鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白的差异极其明显，其中鹿角托盘17KD蛋白是鹿角托盘中的特异蛋白。 3、首次从鹿角托盘中分离纯化出鹿角托盘17KD蛋白。分离纯化的鹿角托盘17KD蛋白经检测达到电泳和高效液相纯。 4、对分离纯化的鹿角托盘17KD蛋白的细胞活性进行了研究，结果表明鹿角托盘17KD蛋白对Vero、L929等细胞增殖有明显的影响。 结论： 1、鹿茸、鹿角托盘和鹿骨水溶性总蛋白差异明显。因此，SDS-PAGE法是鉴别鹿茸、鹿角托盘和鹿骨粉末的有效，快速，稳定，简便的方法； 2、作为鹿角托盘中的特异蛋白，17KD蛋白具有明显的促细胞增值活性，为进一步研究鹿角托盘的药理活性及新药研发奠定了基础。