声明
摘要
第1章 绪论
1.1 软电离方式
1.1.1 大气压离子化
1.1.2 基质辅助激光解吸电离
1.2 质量分析器
1.2.1 四极杆质谱仪
1.2.2 离子阱质谱仪
1.2.3 飞行时间质谱仪(TOF)
1.2.4 静电场轨道阱质谱仪(Orbitrap)
1.3 质谱在核酸分析中的应用
1.3.1 样品处理
1.3.2 样品预分离
1.3.3 碱基加合物的鉴定
1.3.4 核酸测序
1.4 质谱在蛋白质分析中的应用
1.4.1 蛋白质结构鉴定
1.4.2 蛋白质定量方法
1.4.3 蛋白质疾病标记物
1.5 本论文研究的构想
第2章 目标链DNA甲基化的超灵敏质谱检测
2.1 前言
2.2 实验部分
2.2.1 试剂耗材
2.2.2 仪器
2.2.3 基因组DNA的提取纯化
2.2.4 目标DNA的捕获及水解
2.2.5 质谱分析
2.2.6 甲基化特异性PCR
2.3 结果与讨论
2.3.1 工作原理
2.3.2 可行性分析
2.3.3 方法验证
2.3.4 准确度及重现性
2.3.5 临床组织样品分析
2.4 小结
第3章 三核苷酸重复序列的高灵敏度质谱检测
3.1 前言
3.2 实验部分
3.2.1 试剂耗材
3.2.2 仪器
2.2.3 基因组DNA的提取纯化
3.2.4 PCR扩增体系及电泳表征
3.2.5 目标DNA的捕获及水解
3.2.6 质谱检测
3.3 结果与讨论
3.3.1 工作原理
3.3.2 可行性分析
3.3.3 质谱条件优化
3.3.4 标准曲线的建立
3.3.5 临床样品检测
3.4 小结
第4章 基于纳米粒子编码的蛋白质免疫质谱分析
4.1 前言
4.2 实验部分
4.2.1 试剂耗材
4.2.2 仪器
4.2.3 脂质体标记检测抗体
4.2.4 磁珠标记捕获抗体
4.2.5 目标蛋白的捕获及脂质体免疫复合物的形成
4.2.6 MADLI-TOF-MS检测
4.3 结果与讨论
4.3.1 工作原理
4.3.2 脂质体的表征
4.3.3 方法可行性
4.3.4 标准曲线的建立
4.3.5 临床样品检测
4.4 小结
第5章 基于脂质体信号放大的单分子核酸质谱分析
5.1 前言
5.2 实验部分
5.2.1 试剂耗材
5.2.2 仪器
5.2.3 脂质体制备
5.2.4 脂质体标记检测探针
5.2.5 磁珠上标记捕获探针
5.2.6 病毒核酸提取及超声处理
5.2.7 目标核酸的捕获及脂质体的释放
5.2.8 质谱检测
5.3 结果与讨论
5.3.1 工作原理
5.3.2 脂质体的表征
5.3.3 脂质体粒径的选择
5.3.4 PEG添加量的影响
5.3.5 粒子数的验证
5.3.6 不同浓度脂质体的ESI-MS检测
5.3.7 DNA目标链检测
5.3.8 HCV病毒核酸的检测
5.4 小结
结论
参考文献
附录A 攻读博士学位期间发表的主要学术论文目录
致谢