羟基磷灰石纳米粒子对K562细胞增殖抑制作用的研究

摘要

纳米粒子(nanoparticle)也叫超微粒子，一般是指尺寸在1～100nm间的粒子，其独特的物理化学特性已经引起了人们极大的研究兴趣。纳米技术是推动当今医学发展的主要动力之一，在肿瘤防治方面的研究已成为目前的研究热点。其中，羟基磷灰石纳米粒子抑癌作用的研究，得到了越来越多的关注。本文探讨了羟基磷灰石纳米粒子在体外对人慢性髓性白血病K562细胞增殖的影响，为其在白血病治疗中的远期临床应用提供了一些基础性的实验依据。 本课题采用均相沉淀法制备羟基磷灰石纳米粒子溶胶，并应用激光粒度分析仪、X-射线衍射、透射电镜等对其粒径、结晶度、形貌等进行了表征。结果显示：羟基磷灰石纳米粒子为短柱状，平均大小为15nm×60nm，平均粒径为64nm。 将制备的羟基磷灰石纳米粒子，首先以三种浓度通过MTT法和生长曲线测定法筛选出最佳作用浓度，然后进一步通过形态学观察、超微结构观察、细胞周期分析和细胞凋亡率检测，以及核仁组成区嗜银蛋白染色和Feulgen染色等实验，研究了羟基磷灰石纳米粒子对K562细胞的形态、超微结构、细胞周期、细胞凋亡率、核仁组成区嗜银蛋白含量和DNA含量的影响。 实验结果显示：0.56mmol/L的羟基磷灰石纳米粒子对K562细胞的抑制作用最明显，抑制率高达85.20﹪；经0.56mmol/L的羟基磷灰石纳米粒子作用后，K562细胞数目减少，折光性降低，体积减小；出现胞质空泡化，线粒体和内质网肿胀，胞质脱落等一系列变化；在羟基磷灰石纳米粒子处理细胞的2～4天之间，随着作用时间的延长，K562细胞首先出现G2/M期阻滞，随后G2/M期细胞数量减少，细胞出现G1期阻滞，并且细胞凋亡率升高；细胞核仁组成区嗜银蛋白含量减少，胞核直径减小，DNA含量减少。 综上所述，羟基磷灰石纳米粒子具有显著的体外抗白血病作用，具有很强的远期临床应用价值。其诱导K562细胞死亡的可能机理是：羟基磷灰石纳米粒子进入K562细胞后，引发了细胞凋亡、细胞胀亡以及胞体割裂等多种细胞死亡方式，导致细胞增殖抑制，引起细胞死亡。

目录

文摘

英文文摘

第一章 前言

第二章 羟基磷灰石纳米粒子的制备和表征

第三章 羟基磷灰石纳米粒子对K562细胞的增殖抑制作用

第四章 羟基磷灰石纳米粒子对K562细胞增殖抑制机理初探

第五章 结论

参考文献

附录：硕士期间发表文章

致谢