槲皮素作用于S6跨膜结构域的I502氨基酸残基激活野生型hkv1.5离子通道

摘要

目的：探讨槲皮素对野生型hkv1.5及其突变体1502A离子通道作用及其鉴定其作用位点． 方法：将hkv1.5通道(野生型，突变型)基因表达在非洲爪蟾卵母细胞膜上，使用双微电极电压钳技术记录这两种通道的离子流并用槲皮素进行干预． 结果：槲皮素呈电压，浓度，时间依赖性的激活野生型hkv1.5通道，同时也加快了通道的激活和失活进程。然而，相同剂量的槲皮素没有改变突变型I502A离子通道的激活和失活动力学特性。另外，0.3 mmol/L的过氧化氢同样激活了野生型hkv1.5通道，过氧化氢作用细胞后，再在细胞外液中分别加入两种天然的抗氧化剂-100μmol/L槲皮素和4μmol/L丹参酮ⅡA，发现丹参酮ⅡA能够完全解除过氧化氢对通道的激活作用，而槲皮素却没有改变过氧化氢的这一作用。 结论：(1) 槲皮素激活了野生型hkv1.5通道而且明显增强其离子流；(2) hkv1.5离子通道S6结构域的I502残基的突变解除了槲皮素的激活作用，故可推测S6结构域的脂肪族中性氨基酸I502是槲皮素激活野生型hkv1.5通道的重要作用位点；(3) 槲皮素对通道的激活作用并不是其经典的抗氧化作用机制的体现。

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声明

文摘

英文文摘

第一部分槲皮素用物于S6跨膜结构域的I502氨基酸活野生型hkv1.5离子通道

前言

材料和方法

一、材料

二、方法

实验结果

1.槲皮素电压依赖性的激活野生型hKv1.5通道，而对突变型J502A通道没有作用

2.槲皮素浓度时间依赖性的激活野生型hKv1.5通道

3.槲皮素对野生型hKv1.5通道的激活作用没有状态依赖性

4.槲皮素激活野生型hKv1.5通道不是通过其经典的抗氧机制起作用的

讨论

结论:

第二部分 Quercetin activates wild type hKv1.5channel expressed in Xenopus oocytes by a residue I502 in S6transmenbrane Domain

Introduction

Materials and methods

Animals

In vitro transcription and functional expression in Xenopus oocytes

Electrophysiology recording

Reagent

Data analysis

Results

Voltage-dependent activation of WT hKv1.5 channel but not to I502A channel by quercetin

Concentration-dependent and time-dependent enhancement of WT hkv1.5 current by quercetin

Absence of use-dependent activation of WT hkv1.5 current by quercetin

Quercetin-inducde changes in WT hkv1.5 properties may be foreign to itself anti-oxidative action.

Discussion

Conclusion

Acknowledgements

References

第三部分综述kv1.5与房颤的研究进展

摘要

1.电压依赖性钾离子通道的分子结构

2.超速延迟整流钾通道的分子生物学基础和生物学特征

3.Kv1.5通道的药理学特性

4.Kv1.5通道阻滞剂的临床应用

5.Kv1.5通道的调节

6.Kv1.5通道在病理状态下的变化及其意义

7.Af发病

8.房颤的病因及发病机制

9.房颤的治疗现状

10.结语

参考文献

致谢