DLC-1、C-myc在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达和临床意义

摘要

目的:肿瘤的生长是多因素作用影响的结果。检测肿瘤抑制基因DLC1的mRNA及其编码产物 DLC1在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况,同时检测癌基因C-myc在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的中的表达。初步探讨: DLC1①和DLC1 mRNA与宫颈癌发生、发展的关系及其临床病理意义;②宫颈癌中C-myc和C-myc mRNA的表达其临床病理意义;③探讨宫颈癌组织中DLC1与 C-myc表达之间的关系。
　　方法:收集宫颈组织的临床标本(正常宫颈7例;宫颈上皮内瘤变Ⅰ～Ⅱ5例;宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ或原位癌10例;早期浸润癌5例;中晚期癌9例)。采用RT-PCR提取各组标本的mRNA,逆转录成cDNA,加入设计合成的各种基因的引物进行扩增,对扩增产物行琼脂糖电泳,利用灰度分析软件对电泳条带进行灰度计算,反映各种指标的相对表达值。采用免疫组化PV-9000二步法方法检测(正常宫颈15例;宫颈上皮内瘤变20例;宫颈癌40例)DLC-1、C-myc蛋白在宫颈各种组织中的表达情况及与宫颈癌临床病理参数(年龄、临床分期、淋巴结转移状况、组织学分级等)的相关性进行分析。所有标本均经10％中性福尔马林液固定,石蜡包埋,常规制作切片,厚度4μm。每例切片经 HE染色后光镜观察确立诊断。最后利用SPSS13.0软件包对各组数据进行统计学分析,P<0.05被认为差异有统计学意义。
　　结果:RT-PCR结果表明: DLC1 mRNA在正常宫颈组织与宫颈癌中的表达存在明显差异(P<0.05),正常宫颈组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达存在明显差异(P<0.05),宫颈癌中呈低表达或缺失;C-myc mRNA在正常宫颈组织与宫颈癌中的表达存在明显差异(P<0.05),正常宫颈组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达存在明显差异(P<0.05),宫颈癌中呈高表达或缺失。用免疫组化结果表明:15例正常宫颈组织中DLC1的阳性表达率为100％(15/15例);20例宫颈上皮内瘤变组织中DLC1的阳性表达率为70％(14/15例);40例宫颈癌组织中DLC1的阳性表达率为45％(18/40例)。三组之间 DLC1的阳性表达率有显著差异(χ2=16.984,P<0.01)。宫颈癌中DLC1阳性表达率低于正常宫颈组织,差异有显著统计学意义(χ2=8.094,P<0.01);而宫颈上皮内瘤变与正常宫颈组织和宫颈癌组织之间的DLC1阳性表达率均无差异性(P>0.05)。15例正常宫颈组织中C-myc的阳性表达率为0％(0/15例);20例宫颈上皮内瘤变组织中C-myc的阳性表达率为45％(9/20例);40例宫颈癌组织中C-myc的阳性表达率为60％(24/40例)。C-myc在三组之间的阳性表达率存在显著差异(χ2=15.950,P<0.01)。正常宫颈组织中C-myc的阳性表达率低于上皮内瘤变组织中的阳性表达率(χ2=6.883,P<0.01)和宫颈癌组织中的阳性表达率(χ2=15.986,P<0.01)。DLC-1蛋白的表达与 FIGO临床分期(χ2=10.712,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=4.913,P<0.05)和肿瘤分级相关(χ2=6.434,P<0.05),差异有统计学意义。C-myc蛋白的表达与 FIGO临床分期(χ2=8.062,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=2.698, P<0.05)、肿瘤分级相关(χ2=6.563,P<0.05),差异有统计学意义。DLC1与 C-myc蛋白表达呈负相关,相关性有显著统计学意义( P<0.01)。
　　结论:初步证明宫颈癌中有DLC1和DLC1 mRNA低表达或缺失,其表达水平明显低于正常宫颈组织,表明DLC1与宫颈癌的发生、发展有关。有淋巴结转移的宫颈癌病例,DLC1的表达均显著低于无淋巴结转移者,宫颈癌中DLC1的表达与和FIGO分期、淋巴结转移、病理分级相关,表明DLC1在宫颈癌的侵袭、转移和进展中可能起重要作用。②C-myc和C-myc mRNA在宫颈癌中呈高表达,其表达水平明显高于正常宫颈组织。宫颈癌中C-myc的表达与FIGO分期、淋巴结转移、病理分级相关,提示C-myc高表达与宫颈癌的侵袭、转移和进展有关。③联合检测DLC1和C-myc在宫颈癌中的表达,可作为评价宫颈癌生物学行为和判断预后的参考指标,并有望成为肿瘤基因治疗中的新靶点。

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引 言

材料与方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

结果

第一部分：DLC1、C-myc mRNA 在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达

第二部分： DLC1 、C-myc 蛋白在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达

讨论

结论

参考文献

综 述

后 记

附录：攻读硕士学位期间发表的部分学术论著