双随体小染色体功能元件的研究及小染色体同源区域-D、G组染色体短臂处源基因的表达研究

摘要

该研究以BM为材料,一方面对其功能元件的序列特性进行了分析,为进一步利用BM功能元件构建便于体外操作的人类人工微染色体和寻找安全的基因导入位点打下了基础;另一方面根据BM来源于D、G组染色体短臂的特点,利用BM特异性片段构建了D、G组染色体短臂导向的基因打靶载体--人源性基因载体,并成功地利用该载体将外源基因定点导入基因组中D、G染色载体,并成功地利用该载体将外源基因定点导入基因组中D、G组染色体短臂的安全靶位点,外源基因的有效、稳定表达.1.BM功能元件的获得及其序列特性分析;该部分研究通过文库筛选获得了BM与D、G组染色体短臂同源的DNA片段约120kb,并对其进行亚克隆测序及序列特性分析,以期为治疗基因定点插入提供安全、有效的靶位点.2.BM同源区域--D、G组染色体短臂外源基因的表达研究;该研究探讨了BM功能元件用于体内、体外构建人类人工微染色体的可行性,同时利用BM特异性片段成功地构建了能稳定复制的基因打靶载体,实验证明该载体能将外源基因定点整合到基因组中无重要生理功能相关基因的区域--D、G组染色体短臂并稳定、有效表达.

目录

前 言

第一部分双随体小染色体功能元件的研究

材料与方法

结 果

讨论

参考文献

第二部分D、G组染色体短臂外源基因的表达研究

材料与方法

结 果

讨论

结 论

参考文献

缩写词表

综述1：人类着丝粒结构及功能研究进展

综述2：血友病B的基因治疗

简历

致谢