致病杆菌CB43菌株抑菌作用及抗菌物质的分离与纯化

摘要

本文研究了CB43菌株代谢物对番茄灰霉病菌的抑制作用及抑菌作用机理，测定了CB43菌株抗菌代谢产物的理化性质，利用大孔吸附树脂和离子交换层析技术进行了抗菌物质的分离与纯化。　　本文筛选出对番茄灰霉病菌具有强烈抑制作用的CB43菌株；研究了CB43菌株代谢物的抗菌作用机理；确定了以枯草芽孢杆菌代替番茄灰霉病菌作为抗菌物质分离提取过程中的指示菌；测定了CB43菌株抗菌代谢产物在不同pH及温度组合下的稳定性；测定了抗菌物质的极性和带电荷性；筛选出适合纯化抗菌物质的110弱酸树脂；通过紫外检测，3个主要组分的最大吸收值分别在280nm，216nm和190nm～200nm的末端吸收。用HPLC固定波长检测，3个主要组分均已经初步得到纯化。

目录

文摘

英文文摘

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第一章绪论

1.1研究目的和意义

1.2农用抗生素研究概况

1.2.1农用抗生素的定义

1.2.2农用抗生素的发展过程

1.2.3农用抗生素的特点

1.2.4农用抗生素的来源

1.2.5农用抗生素的提取方法

1.2.6农用抗生素的作用机制

1.2.7农用抗生素的研究开发进展

1.3致病杆菌抗菌代谢产物

第二章菌株筛选与发酵液对番茄灰霉菌抑制作用

2.1材料

2.1.1供试菌株

2.1.2培养基

2.1.3试剂

2.1.4仪器

2.2方法

2.2.1菌株发酵培养

2.2.2发酵液预处理

2.2.3菌株筛选

2.2.4灰葡萄孢分生孢子悬浮液的制备

2.2.5 CB43发酵液对灰葡萄孢菌丝生长的抑制作用

2.2.6 CB43发酵液对灰葡萄孢菌菌丝形态的影响

2.2.7 CB43发酵液对灰葡萄孢分生孢子萌发的影响

2.2.8 CB43发酵液对灰葡萄孢分生孢子的作用类型

2.2.9发酵液防治番茄灰霉病盆栽试验

2.3结果与分析

2.3.1菌株筛选

2.3.2 CB43发酵液对灰葡萄孢菌丝生长的抑制作用

2.3.3 CB43发酵液对菌丝的作用类型

2.3.4 CB43发酵液对灰葡萄孢菌丝形态的影响

2.3.5 CB43发酵液对灰葡萄孢分生孢子萌发的影响

2.3.6 CB43发酵液对灰葡萄孢分生孢子的作用

2.3.7发酵液对番茄灰霉病的盆栽防治效果

2.4讨论

第三章致病杆菌CB43菌株抗菌代谢物质理化性质

3.1材料

3.1.1供试菌株

3.1.2培养基

3.1.3试剂

3.1.4仪器

3.2方法

3.2.1菌株发酵培养

3.2.2发酵液预处理

3.2.3指示菌的筛选

3.2.4不同温度下酸碱稳定性测定

3.2.5极性测定

3.2.6电离性测定

3.3结果与分析

3.3.1指示菌的筛选

3.3.2热稳定性和酸碱稳定性

3.3.3极性测定

3.3.4纸电泳

3.4讨论

第四章抗菌代谢物质大孔树脂吸附提取技术探索

4.1材料

4.2仪器

4.3方法

4.3.1发酵液预处理

4.3.2大孔吸附树脂的预处理

4.3.3大孔吸附树脂的选择

4.3.4最佳吸附pH值的确定

4.3.5动态吸附效果测定

4.3.6洗脱条件的确定

4.4结果与分析

4.4.1大孔吸附树脂的筛选

4.4.2最佳吸附pH值的确定

4.4.3大孔吸附树脂柱动态吸附效率测定

4.4.4乙醇水梯度洗脱

4.4.5乙醇水用0.01N的HCI酸化后梯度洗脱

4.4.6洗脱放大实验

4.5讨论

第五章抗菌代谢物质的分离、纯化

5.1材料

5.2仪器

5.3方法

5.3.1筛选离子交换柱

5.3.2纯度分析

5.4结果与分析

5.4.1离子交换树脂的筛选

5.4.2动态吸附最佳流速的测定

5.4.3 110离子交换树脂交换能力

5.4.4洗脱效果

5.4.5分步洗脱效果

5.4.6纯度检测

5.5讨论

结论与讨论

参考文献

致谢

作者简历