声明
摘要
1.文献综述
1.1甲醛的污染现状与毒性研究
1.1.1甲醛的分布与污染现状
1.1.2甲醛的毒性研究
1.2 Hormesis效应
1.2.1 Hormesis效应的分子机制
1.3细胞增殖
1.3.2细胞增殖与糖代谢
1.3.3细胞增殖与生长信号转导分子
1.4立项依据与研究意义
2.材料与方法
2.1实验对象
2.1.1细胞冻存
2.1.2细胞复苏
2.2实验试剂及器材
2.2.1主要试剂的配制
2.3低浓度甲醛促进细胞增殖的安全剂量模型的建立
2.3.1甲醛染毒方案
2.3.2细胞活力的测定
2.4甲醛Hormesis效应的分子机制探究
2.4.1甲醛染毒方案
2.4.2细胞活力的测定
2.4.3细胞内氧化应激指标的测定
2.4.4 ELISA法检测
2.5实时荧光定量法(Real-Time PCR,RT-PCR)检测
2.5.1细胞总RNA的提取
2.5.2反转录得cDNA
2.5.3 RT-PCR
2.6数据分析
3.结果与分析
3.1甲醛对细胞增殖的安全剂量范围
3.2低浓度甲醛对细胞内氧化应激水平的影响
3.2.1 VE浓度的筛选
3.2.1 K562细胞内的氧化应激情况
3.2.2 16HBE细胞内的氧化应激情况
3.2.3细胞活力的变化
3.3低浓度甲醛对细胞分裂的影响
3.3.1低浓度甲醛对CyclinD-cdk4含量的影响
3.3.2低浓度甲醛对E2F1含量的影响
3.4低浓度甲酶对糖代谢(Warburg效应)的影响
3.4.1低浓度甲醛对PKM2含量的影响
3.4.2低浓度甲醛对葡萄糖含量的影响
3.4.3低浓度甲醛对乳酸含量的影响
3.5低浓度甲醛对生长信号转导分子的影响
3.5.1 PD-153035处理后细胞生长活力情况
3.5.2低浓度甲醛对EGFR含量的影响
3.5.2低浓度甲醛对PCNA含量的影响
4.讨论
4.1细胞的选择
4.2低浓度甲醛可以促进细胞增殖
4.3甲醛的Hormesis效应与氧化应激有关
4.3.1低浓度甲醛可以通过影响氧化应激介导的细胞分裂关键因子促进细胞增殖
4.3.2低浓度甲醛可以通过影响氧化应激介导的糖代谢(Warburg效应)关键因子促进细胞增殖
4.4低浓度甲醛通过直接影响生长信号转导分子促进细胞增殖
5.结论与展望
5.1主要结论
5.2展望
参考文献
附录
在校期间发表的论文、科研成果等
致谢