布洛芬立体拆分菌株的离子束诱变选育及拆分条件的优化

摘要

通过改进前人的相关方法,建立了快速定性与定量检测布洛芬的方法,该方法快速、准确,优于药典法.从土壤中分离到的154个菌株中,根据罗丹明B的显色反应,26株具备不同程度水解布洛芬乙酯的能力;通过旋光度的测定筛选到能立体选择性水解布洛芬乙酯生成S-布洛芬的菌株有2株,其中代号为T<,2P>的菌株水解能力较强,S-布洛芬的产量较高.经Biolog系统鉴定,T<,2P>为Candida sorboxylosa.利用正交实验确定了菌株Candida sorboxylosa T<,2P>培养的最适条件.培养的最适温度为34℃,适宜的培养基组分为：酵母抽提物1.2﹪、吐温800.5﹪（v/w）、葡萄糖1.0﹪、蛋白胨0.6﹪、磷酸氢二钾0.1﹪.用低能离子束诱变的方法诱变菌株Candida sorboxylosa T<,2P>得到了几株布洛芬乙酯水解活性有所提高的突变株,有的突变株应用后可提高S-布洛芬的产量达20﹪以上;同时,也证明低能离子束诱变是一种有效的诱变方法.用菌株Candida sorboxylosa T<,2P>的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度、红外色谱和核磁共振色谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S-布洛芬基本一致,这表明该菌株具有应用于S-布洛芬生产的潜力.

目录

摘要

Abstract

前言

第一章布洛芬乙酯的合成及布洛芬的检测

一材料与方法

1实验材料

2实验仪器

3实验方法

二结果与分析

1测定结果

2讨论

第二章立体选择性水解布洛芬乙酯菌株的筛选

一材料与方法

1化学试剂

2实验材料

3实验设计

4实验方法

二结果与分析

1筛选结果

2讨论

第三章菌株Candida sorboxylosa T2P的培养基和培养条件的优化

一材料与方法

1实验材料

2实验方法

二结果与分析

1正交实验结果

2讨论

第四章菌株发酵性质的研究

一材料与方法

1实验材料

2实验仪器

3实验方法

二结果与讨论

1酶性质的确定

2讨论

第五章离子束诱变育种

一材料与方法

1实验材料

2实验仪器

3培养基

4实验方法

二结果与讨论

1诱变剂量的确定

2讨论

第六章布洛芬的提取与鉴定

一材料与方法

1化学试剂

2实验材料

3实验仪器

4实验方法

二结果与分析

1检测结果

2讨论

结论

参考文献

致谢