番茄抗细菌性斑点病的遗传特性和抗性基因的分离及鉴定

摘要

我们开展了番茄抗细菌性斑点病的研究.该研究的目标是：（1）确定番茄抗细菌性斑点病的遗传特性.（2）从中国番茄品种中获得抗番茄细菌性斑点病基因Pto的克隆.试验中采用番茄抗病品种和感病品种,通过常规规杂交及鉴定其子代的抗病性分离情况,确定在抗性品种红珍珠和美味樱桃中该抗病性呈显性单基因遗传.根据已报道Pto基因的同源序列设计引物,通过PCR扩增从10个抗病番茄品种中获得10个克隆.序列分析比较证明其中两个克隆（XX和BJX）和报道的Pto基因序列完全一致,表明我们已经从中国的番茄品种中获得了含有该基因的克隆.克隆XX序列编码区全长936核苷酸对,推导编码311个氨基酸,分子量为34kDa的蛋白.其余几个克隆与报道Pto基因序列的同源性在91﹪以上,因而为Pto基因同源序列.构建了Pto基因的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS菌株,成功地实现了该基因的原核表达.结果产生出了表观分子量为31kDa的特异性蛋白.

目录

摘要

Abstract

第一章 文献综述

1番茄细菌性斑点病的分布及发生规律

1.1番茄细菌性斑点病的分布

1.2番茄细菌性斑点病的危害症状和发病规律

2丁香假单孢杆菌番茄致病变种(PST)的形态、生理生化特性、致病机理和检测

2.1 PST的形态及生理生化特性

2.2 PST的致病机理和检测方法

3.病害的防治方法

4.抗细菌性斑点病的番茄品种及其抗病机理

4.1抗细菌性斑点病的番茄品种

4.2番茄抗细菌性斑点病的作用机理

4.3番茄抗PST基因Pto及其遗传规律

5植物抗病基因的分离方法

5.1图谱克隆法

5.2转座子标签法

5.3从蛋白质到基因的分离克隆法

5.4酵母双杂种杂交法

5.5抗病基因类似序列法

6本研究的目的和意义

第二章 番茄抗细菌性斑点病的遗传特性

1材料与方法

1.1试验材料

1.2技术路线

1.3试验方法

2.结果与分析

2.1杂交F1代植株的抗病性

2.2杂交F2代植株和回交一代植株的抗病性分离情况

第三章 番茄抗细菌性斑点病基因Pto的分离和鉴定

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果与分析

2.1番茄抗细菌性斑点病基因的PCR扩增

2.2转化子质粒鉴定

2.3所获克隆的序列测定及其序列分析

2.4所获Pto基因序列的原核表达

第四章 结论和讨论

参考文献

致谢