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水体中溶藻细菌EG的分离及其溶藻特性研究

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1前言

1.1蓝藻水华的成因

1.2蓝藻水华的危害

1.3水华的主要防治措施

1.3.1物理方法

1.3.2化学方法

1.3.3生物方法

1.4溶藻细菌的研究趋势

1.4.1 PCR技术和16Sr RNA序列分析相结合

1.4.2在分子水平上研究细菌的溶藻机制

1.4.3细菌溶藻能力与生态因素的关系

1.5本课题的目的和意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1供试藻种

2.1.2培养基

2.1.3试剂

2.1.4主要仪器设备

2.1.5采样点

2.2方法

2.2.1藻的叶绿素a含量测定

2.2.2溶藻细菌的分离和纯化

2.2.3溶藻细菌的溶藻范围试验

2.2.4溶藻细菌EG46对土生席藻的溶藻特性

2.2.5 EG46的16S rDNA序列分析

2.2.6 EG46毒性检测试验

2.2.7 EG46对野生藻种的溶解试验

3结果与分析

3.1溶藻细菌的分离

3.2溶藻细菌的溶藻范围

3.3溶藻细菌EG46对土生席藻的溶藻特性

3.3.1溶藻方式探讨

3.3.2 EG46对土生席藻作用的显微镜观察

3.3.3不同接菌量下EG46的溶藻效果

3.3.4 EG46不同生长期上清液溶藻效果比较

3.3.5光照条件对EG46溶藻作用的影响

3.3.6不同pH值下EG46的溶藻效应

3.3.7硝酸钠和氯化钙对EG46溶藻作用的影响

3.3.8不同盐度下EG46的溶藻效应

3.4 EG46的16S rDNA序列分析

3.5 EG46毒性检测结果

3.6 EG46对野生藻种的溶解效果

4小结与讨论

4.1溶藻细菌的分离

4.2 EG46溶藻的作用过程

4.3不同菌浓度下EG46的溶藻效力

4.4环境因子对EG46溶藻效力的影响

4.5 EG46应用前景

参考文献

致谢

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摘要

本文是为获得水华的应急控制方法而开展的有关溶藻细菌的工作。主要结果如下: 1.从发生水华的景观水体中分离到60株细菌,其中编号为EG46的菌株表现出较强的溶藻效果。经16SrDNA序列分析,EG46为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)。毒性检测试验表明EG46不产生毒素。 2.试验发现,EG46对选用的土生席藻、水华鱼腥藻、弱细颤藻等蓝藻及小环藻均有很强的溶解作用。该菌通过分泌胞外物质溶藻,且从对数期开始分泌溶藻物质,到稳定期溶藻活性物质量达到最大;菌体浓度为5×107cfu/mL时,7d后对土生席藻去除率达到87.5%。 3.光照、pH、盐度及硝酸钠和氯化钙浓度对细菌EG46溶藻效力有较大影响。在光周期(L:D=16h:8h)、中性(pH7)、盐度(4‰NaCl)以及培养基中硝酸钠和氯化钙浓度加倍的环境条件下,EG46具有更强的溶藻效力。 4.试验表明EG46对野生藻种具有一定的溶解作用,说明其可能独立应用于小水体来控制藻类水华。

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