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黑杨派无性系SN05-11和LN05-51再生体系的研究

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声明

1 前言

1.1 文献综述

1.1.1杨树组织培养的意义

1.1.2杨树组织培养的研究

1.1.3影响杨树组织培养成功的因素

1.2研究的目的和意义

1.3技术路线

2材料与方法

2.1 材料

2.2试验方法

2.2.1外植体的消毒

2.2.2不定芽的分化

2.2.3不定芽的继代增殖培养

2.2.4壮苗培养

2.2.5生根培养

2.2.6炼苗移栽

2.3统计指标

2.4数据分析

3结果与分析

3.1外植体的消毒

3.1.1不同消毒时间对SN05-11外植体成活率的影响

3.1.2不同消毒时间对LN05-11外植体成活率的影响

3.2不定芽的分化

3.2.1 SN05-11的不定芽分化

3.2.2 LN05-51的不定芽分化

3.3不定芽的继代增殖培养

3.3.1激素对不定芽增殖的影响

3.3.2 pH值对不定芽增殖的影响

3.3.3琼脂浓度对不定芽增殖的影响

3.3.4蔗糖浓度对不定芽增殖的影响

3.4壮苗培养

3.5生根培养

3.5.1 SN05-11的生根培养

3.5.2 LN05-51的生根培养

3.6炼苗移栽

4讨论

4.1外植体的污染

4.2外植体的褐变

4.3激素的作用

4.4培养条件对不定芽增殖的影响

4.5炼苗移栽

参考文献

图版

致谢

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摘要

黑杨派杨树是湖北栽培最广,经济价值最高的杨树种类-I-69杨和I-72杨是20世纪70年代我国从意大利引进的优良美洲黑杨和欧美杨无性系,在湖北广泛栽培。辽宁杨是湖北省1999年从辽宁省林科院引进的黑杨派优良品种,在湖北地区广泛种植,生长表现良好。SN05-11为72杨(Populus×euramericana‘SanMartino’,圣马丁诺杨)×辽宁杨(Populus liaoningensis)的F1代,LN05-51为69杨(Populus deltiodes‘Lux’,鲁克斯杨)×辽宁杨的F1代,在生长量方面具有显著杂种优势。
   本研究以SN05-11和LN05-51的外植体为材料,研究了不同外植体、植物生长调节剂、pH值、琼脂浓度、蔗糖浓度等因素对SN05-11和LN05-51再生体系的影响,为基因转化奠定基础。主要的研究结果如下:
   1.SN05-11和LN05-51的最佳外植体为叶片和叶柄。叶柄消毒的最佳方法为:75%酒精消毒30S后在0.1%升汞处理1min,SN05-11的成活率为81.1%,SN05-11的成活率为86.7%;叶片消毒的最佳方法为:75%酒精消毒30S后用0.1%升汞处理3min,SN05-11的成活率为80.0%,SN05-11的成活率为83.3%。
   2.SN05-11最佳不定芽诱导分化培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L,不定芽分化率为78.4%;LN05-51最佳不定芽诱导分化培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+TDZ0.02mg/L,不定芽分化率为81.6%。
   3.SN05-11最佳继代增殖培养基为MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.O1mg/L,增殖系数为5.0。LN05-51最佳继代增殖培养基为MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.05mg/L,增殖系数为5.2。pH值6.2、琼脂浓度6g/L和蔗糖浓度30g/L最有利于不定芽的增殖。
   4.经过继代增殖培养后,无菌苗矮小纤细,需经过壮苗培养以使无菌苗健壮和伸长,以利于生根培养。SN05-11和LN05-51的壮苗培养基为MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L。
   5.SN05-11最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L,生根率为94.7%。LN05-11的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L,生根率为100%。
   6.SN05-11和LN05-51的最佳培养基质为沙子:土壤(1:1),成活率分别为83.5%和93.2%。

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