猪口服恩诺沙星包被剂的药物动力学研究

摘要

本试验采用高效液相色谱法对恩诺沙星包被剂的药物含量、包封率、体外释放度以及稳定性进行了研究。采用Agilent TC-C18（4.6×150 mm，5μm）色谱柱，流动相为乙腈-5 g/L柠檬酸-三乙胺（160：840.2，v/v/v），流速为1 mL/min，柱温40℃，检测波长278 nm作为恩诺沙星包被剂含量测定、包封率测定、体外释放度试验以及稳定性试验的色谱检测条件，恩诺沙星在此检测条件下色谱峰峰形良好，且不与杂质峰分离充分，方法稳定可靠，重现性好。
　　 在含量测定试验及体外释放度试验的基础上，对恩诺沙星包被剂在猪体内的药物动力学以及丙磺舒对恩诺沙星包被剂在猪体内的药动学特征的影响进行了研究，考察了恩诺沙星包被剂的缓释效果以及丙磺舒对恩诺沙星包被剂在猪体内消除过程的影响。试验过程中自行建立了猪血浆中恩诺沙星和环丙沙星的液液萃取方法，使用乙腈和冰醋酸作为萃取试剂，采用Agilent TC-C18（4.6×150 mm，5μm）色谱柱对血浆样品中的恩诺沙星和环丙沙星进行分离，以乙腈-磷酸盐缓冲液（pH3）（12：88，v/v）作为流动相，流速1 mL/min，紫外检测波长278nm，柱温40℃作为猪血浆中恩诺沙星和环丙沙星的色谱检测条件，经试验，恩诺沙星和环丙沙星的萃取绝对回收率分别高于84.02±6.48％和78.97±6.01％，恩诺沙星日内变异系数小于5.95％，日间变异系数小于7.71％，环丙沙星日内变异系数小于5.22％，日间变异系数小于10.16％，恩诺沙星和环丙沙星的血浆标准曲线线性关系好，相关系数（r）分别达到0.9995和0.9996，恩诺沙星和环丙沙星在猪血浆中的定量限均为0.05μg/mL，恩诺沙星和环丙沙星的色谱峰能够很好地与杂质色谱峰分离，使测定不受干扰，所建立的药物萃取和测定方法稳定可靠，重现性好。
　　 将18只健康猪，随机平均分为三组，分别以10 mg/kg体重恩诺沙星单剂量口服恩诺沙星原料药、恩诺沙星包被剂以及恩诺沙星包被剂和丙磺舒（剂量为40 mg/kg体重）。结果表明，恩诺沙星包被剂经口服后，恩诺沙星的吸收半衰期（t1/2ka）为1.07±0.19 h，分布半衰期（t1/2α）为3.34±0.19 h，消除半衰期（t1/2β）为16.06±2.35 h，药时曲线下面积（AUC）为41.83±5.11μg．h/mL，与原料药的t1/2ka（0.67±0.18 h）、t1/2α（1.33±0.10 h）、t1/2β（7.21±1.24 h）和AUC（18.80±2.50μg．h/mL）相比，均显著增加，说明恩诺沙星包被剂经口服在猪体内能获得很好的缓释效果。
　　 恩诺沙星包被剂和丙磺舒联合口服与恩诺沙星包被剂单独口服相比，恩诺沙星和环丙沙星的t1/2β及AUC值均略有增加，恩诺沙星的t1/2β值由16.06±2.35 h增至18.02±2.52 h，AUC值由41.83±5.11μg．h/mL增至49.97±6.44μg．h/mL，环丙沙星的t1/2β值由19.92±2.65 h增至25.71±3.94 h，AUC值由6.27±0.92μg．h/mL增至9.36±1.05μg．h/mL，说明丙磺舒能够进一步延缓恩诺沙星和环丙沙星在猪体内的消除过程。由于丙磺舒仅通过抑制肾小管主动分泌作用来延缓喹诺酮类药物在机体内的消除，从t1/2β和AUC值的变化幅度可以推断出猪体内的恩诺沙星和环丙沙星仅部分通过肾小管的主动分泌作用进行消除。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

1前言

1.1研究背景及意义

1.2喹诺酮类药物简介

1.2.1喹诺酮类药物的发展历程

1.2.2兽医临床中的使用的氟喹诺酮药物

1.3恩诺沙星研究进展

1.3.1恩诺沙星的理化性质

1.3.2恩诺沙星的作用机理及作用特点

1.3.3恩诺沙星的临床应用

1.3.4恩诺沙星含量测定研究进展

1.3.5恩诺沙星药物动力学研究进展

1.3.6恩诺沙星和丙磺舒联合用药的研究进展

1.3.7丙磺舒与其他喹诺酮类药物联合用药的研究进展

1.3.8动物血浆中恩诺沙星提取方法研究进展

1.3.9动物血浆中恩诺沙星检测方法研究进展

1.4研究内容及目标

1.4.1研究内容

1.4.2研究目标

2材料与方法

2.1试验材料

2.1.1药品与试剂

2.1.2仪器设备

2.1.3试验动物与饲料

2.1.4试验相关溶液的配制

2.2试验方法

2.2.1含量测定试验方法

2.2.2包封率测定试验方法

2.2.3释放度测定试验方法

2.2.4稳定性试验方案

2.2.5药物动力学试验方案

3试验结果

3.1含量测定试验结果

3.1.1标准曲线

3.1.2精密度试验结果

3.1.3回收率试验结果

3.1.4包衣材料干扰试验结果

3.1.5供试品含量测定试验结果

3.2包封率测定试验结果

3.2.1包衣外游离药物回收率试验结果

3.2.2包封率测定结果

3.3释放度试验结果

3.3.1释放度试验标准曲线

3.3.2精密度试验结果

3.3.3样品稳定性试验结果

3.3.4释放介质干扰试验

3.3.5释放度试验结果

3.4稳定性试验结果

3.4.1加速试验结果

3.4.2强光照射试验结果

3.5药物动力学试验结果

3.5.1血浆标准工作曲线

3.5.2恩诺沙星和环丙沙星血浆色谱图

3.5.3方法学验证结果

3.5.4药物动力学试验数据

4讨论

4.1含量测定讨论

4.1.1含量测定方法的选择

4.1.2含量测定色谱条件的选择

4.1.3含量测定供试品溶液配制方法的建立

4.2包封率测定试验包衣外游离药物提取方法的建立

4.3体外释放度试验讨论

4.4稳定性试验结果讨论

4.5药物动力学试验讨论

4.5.1血浆药物浓度测定方法的选择

4.5.2血浆样品前处理方法的建立

4.5.3色谱检测条件的选择

4.5.4药物动力学试验结果讨论

5结论

5.1建立了恩诺沙星包被剂的含量测定方法并确定了其含量

5.2建立了恩诺沙星包被剂包封率测定方法并确定了其包封率

5.3通过体外释放度试验初步评价了恩诺沙星包被剂的缓释效果

5.4通过稳定性试验评价了恩诺沙星包被剂的稳定性

5.5建立了猪血浆中恩诺沙星和环丙沙星的提取和检测方法

5.6评价了包被剂的缓释效果并制定了临床给药方案

5.7比较了恩诺沙星包被剂单独口服与包被剂和丙磺舒联合口服在猪体内的药物动力学特征差异

参考文献

致谢

附录