红肉脐橙(Citrus sinenesis Osbeck)果实生长发育过程中类胡萝卜素生物合成基因表达的原位检测

摘要

柑橘是富含类胡萝卜素的水果,大多情况下果皮含量多于果肉。近年来以柑橘红肉突变体为对象的研究引起了越来越广泛的关注,这些突变体一方面赋予本身优良的外观,另一方面为柑橘果实芽变发生的机理研究以及柑橘果肉中的类胡萝卜素生物合成的研究提供了理想的材料。本研究以红肉脐橙(C.sinensis Osbeckcv'Cara Cara')和清家脐橙(C.sinensis Osbeck cv'Seika')为实验材料,利用RNA原位杂交技术分析了果实不同组织中类胡萝卜素生物合成相关基因的表达。主要研究结果如下:
　　 1.通过对汁胞进行徒手切片和压片的显微观察,在红肉脐橙汁胞中检测到了红色线状有色体的存在。在番茄和红色葡萄柚中发现了类似的情形,随着果实发育的进行这种形状的有色体在红肉脐橙汁胞中有积累的趋势。
　　 2.将不同发育时期的红肉脐橙和清家脐橙果实样品制成石蜡切片,利用特异性的cRNA探针进行原位杂交,结果表明:psy、pds、lcyb在红肉脐橙和清家脐橙黄皮层中均有表达；mRNA多积累在接近皮层的表层细胞内,在油胞及其周边组织细胞中未能检测到mRNA的积累；不同果实发育期mRNA的积累存在差异；白皮层和汁胞中相应的mRNA分布没有黄皮层组织中明显,但是可看出白皮层和汁胞中psy、pds、lcyb的表达量低于黄皮层组织中的表达量。