Co辐射创造柑橘突变体的研究

摘要

辐射诱变育种是创造果树新种质的一个有效途径。它不但可以大大提高基因突变频率，而且可以产生小量突变，在改良品种的同时又不会改变原有品种的固有优质性状，从而可能获得常规育种难以获得的新种质。辐射诱变育种与离体培养结合能大大降低嵌合体的比例，可在有限的空间内对大量诱变群体进行选择，提高了后代的筛选、鉴定效率。本实验利用60Coγ射线辐射柑橘品种伏令夏橙（Citrus sinensis Osbeck）和江西无核桠柑（C．reticulata Blanco）接穗和愈伤组织，得到如下结论：
　　 1．伏令夏橙和江西无核椪柑接穗合适的诱变剂量为45Gy左右，剂量率为1.0Gy/min。诱变获得6株江西无核桠柑植株，表现较明显的枝叶变异：叶缘缺刻、叶片变大、4株分枝角度开张，5株叶形指数变小。
　　 2．采用AFLP分子标记技术，选择六对引物E01-MC01、E01-MC02 E01-MC03、E01-MC04、E01-MC05、E01-MC06对江西无核椪柑辐射植株进行遗传变异分析，结果表明：每对引物都检测到辐射苗与对照存在差异带，差异带数依次是4条、3条、4条、6条、7条、3条。
　　 3.60Co辐射对伏令夏橙和江西无核椪柑胚性愈伤组织的生长和分化能力均有影响。伏令夏橙愈伤组织的生长率和体胚发生频率都随着辐射剂量的增加先上升后下降。当辐射剂量为60Gy时，伏令夏橙相对生长率达到140％；辐射剂量为90Gy时，相对生长率下降到54.8％；120Gy时，相对生长率为38.8％。当辐射剂量为60Gy时，辐射后15天，产生胚状体72个/克，显著高于对照；辐射后一个月，产生胚数为589.3个/克，与对照差异不显著。辐射剂量为90Gy和120Gy时，辐射后15天没有胚状体大量发生的情况；辐射后一个月，产生胚数分别为300.3个/克，57.0个/克。江西无核椪柑愈伤组织的生长率和体胚发生频率都随着辐射剂量的增加而呈下降的趋势。辐射后芽生根率很低，大部分保持不生长状态。为提高芽的成活率，本研究利用试管嫁接和温室微芽嫁接两种方法间接生根，成活率分别为24％和35％。
　　 4．辐射后两种材料的再生胚几乎全是畸形。本实验采用五种培养基配方，培养伏令夏橙畸形胚，40天后观察结果，发现培养基（1/2MT+1.0mg/LBA+0.5mg/LKT+0.1mg/LIAA+40g/L蔗糖+7g/L琼脂，pH5.8）再生芽数最多，而且再生芽叶片形态正常，生长势健壮。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

第一章 前言

1果树辐射育种概述

2柑橘辐射育种研究进展

2.1辐射育种在柑橘中取得的成果

2.2诱变材料类型与诱变效果的关系

2.3辐射剂量对诱变效果的影响

2.4突变体的分离鉴定方法

3辐射诱变与组织培养结合育种

3.1柑橘组织培养及其在育种中的应用

3.2辐射诱变与组织培养结合

3.3辐射诱变结合组织培养育种的优缺点

4本研究的目的和内容

第二章 60Co辐射诱变柑橘接穗及其变异鉴定

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1嫁接成活率的统计

2.2辐射对枝叶变异的影响

2.3突变植株的遗传鉴定

3讨论

3.1辐射剂量的选择

3.2遗传变异分析

第三章 60Co辐射诱变柑橘愈伤组织

1材料和方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1不同剂量60Co辐射对愈伤组织生长的影响

2.2不同剂量60Co辐射对愈伤组织分化的影响

2.3合适的诱导畸形胚分化的培养基选择

2.4两种嫁接方法间接生根

3讨论

3.1辐射材料的选择

3.2不同材料的辐射敏感性

3.3温室微芽嫁接快速成苗

3.4辐射促进体胚发生

参考文献

图版和图版说明

致谢