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【6h】

γ-聚谷氨酸对铁和钙吸收率影响及毒理安全性评价

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目录

摘要

Abstract

第一章 文献综述

1 前言

2 γ-PGA的研究进展

2.1 γ-PGA的理化性质

2.2 γ-PGA的合成

2.3 γ-PGA的降解

2.4 γ-PGA的应用研究

2.5 试验动物模型的建立

2.6 毒理学研究

3 目的及意义

第二章 γ-聚谷氨酸对铁吸收的影响

2.1 引言

2.2 材料与方法

2.2.1. 试验主要仪器

2.2.2 试验动物

2.2.3 γ-PGA样品

2.2.4 试验日粮

2.2.5 饲养管理

2.2.6 样品的采集和制备

2.2.7 试验指标的测定

2.2.8 数据分析

2.3 结果与分析

2.3.1 体重和器官重量

2.3.2 血液指标

2.3.3 组织器官铁浓度

2.4 讨论

2.4.1 对大鼠体重及脏器指标的影响

2.4.2 对血液指标的影响

2.4.3 对组织铁浓度的影响

2.5 小结

第三章 γ-聚谷氨酸对钙吸收的影响

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.2.1 试验仪器

3.2.2 试验样品

3.2.3 试验动物

3.2.4 试验日粮

3.2.5 试验方法

3.2.6 观察指标与测定方法

3.2.7 数据分析

3.3 结果与分析

3.3.1 γ-PGA对生长期大鼠体重的影响

3.3.2 γ-PGA对大鼠股骨重量的影响

3.3.3 γ-PGA对大鼠股骨矿物质的影响

3.3.4 γ-PGA对大鼠激素水平的影响

3.4 讨论

3.4.1 γ-PGA对体重的影响

3.4.2 γ-PGA对股骨的影响

3.4.3 γ-PGA对激素水平的影响

3.5 小结

第四章 γ-聚谷氨酸的毒理安全性评定

4.1 引言

4.2 材料及方法

4.2.1 试验样品

4.2.2 试验仪器

4.2.3 试验菌株

4.2.4 试剂

4.2.5 试验方法

4.3 结果与分析

4.3.1 急性毒性试验结果

4.3.2 小鼠精子畸变试验结果

4.3.3 小鼠骨髓微核试验结果

4.3.4 Ames试验结果

4.3.5 30d喂养试验

4.4 讨论

4.5 结论

参考文献

致谢

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摘要

本试验主要研究分子量为100kDa的Y-聚谷氨酸(γ-PGA)对铁和钙吸收的影响,并对(γPGA)进行安全毒理学评价。
  主要包括三部分内容:1.γ-PGA对铁吸收的影响:Wistar雄性大鼠饲喂低铁日粮21d,消耗体内铁贮,建立缺铁模型。21d后断尾采血测定血红蛋白(Hb),选取Hb 90g/L的大鼠进行试验。将模型大鼠随机分为3组,每组10个重复,单笼饲养,γ-PGA添加量分别为0.1%和0.2%,试验期为21d。试验结果表明,各试验组大鼠体重无显著差异(P0.05),0.1%γ-PGA组股骨相对重量极显著高于对照组(P0.01),0.2%γ-PGA组脾脏相对重量极显著高于对照组(P0.01),0.1%和0.2%γ-PGA组肝脏相对重量显著高于对照组(P0.05);0.1%和0.2%γ-PGA组血清铁浓度极显著高于对照组(P0.01),0.2%γ-PGA组血清总铁结合力极显著高于0.1%组和对照组(P0.01);0.1%和0.2%γ-PGA组肝脏铁浓度均极显著高于对照组(P0.01),0.2%γ-PGA组脾脏和股骨铁浓度极显著高于对照组(P0.01)。说明日粮中添加γ-PGA能促进铁的吸收以及肝脏、脾脏和股骨内铁的沉积。2.γ-PGA对钙吸收的影响:Wistar雄性大鼠饲喂低钙日粮28d,建立缺钙模型。28d后测定血清降钙素水平判断模型的建立,将模型大鼠随机分为5组,每组10个重复,单笼饲养。γ-PGA添加量分别为0.1%、0.05%和0.01%,酪蛋白磷酸肽(CPP)添加量为0.1%,试验期为21d。试验结果表明,0.1% CPP和0.05%γ-PGA组日增重水平显著高于对照组(P0.05);0.1%γ-PGA组股骨钙浓度(P0.05)和磷浓度(P0.01)显著高于对照组;γ-PGA各组的骨碱性磷酸酶(BALP)浓度均极显著高于对照组和0.1% CPP组(P0.01)。说明日粮中添加γ-PGA可以显著提高股骨钙和磷的浓度,促进骨骼发育。3.γ-PGA的毒理安全性评价:包括急性毒性试验、小鼠精子畸变试验、骨髓微核试验、Ames试验和30天喂养试验。试验结果显示:小鼠经口灌胃最大耐受剂量15g/kg.bw,属实际无毒级;小鼠精子畸变试验和小鼠骨髓微核试验均显示阴性;鼠沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验选用TA97、TA98、TA100和TA102四株菌株,在S9活化和非活化系统中均显示阴性。30天喂养试验表明:雌性大鼠1.0g/kg-bw和1.5g/kg-bw组日增重均显著低于对照组(P0.05),1.5g/kg-bw组饲料利用率极限著低于对照组(P0.01);1.5g/kg-bw组雌性大鼠的肝脏、脾脏(P0.05)和肾脏(P0.01)鲜重均显著低于对照组;各剂量组雌性大鼠肾脏的相对重量极显著高于对照组(P0.01);0.5g/kg-bw组雌性大鼠粒细胞数目极显著高于对照组(P0.01);1.0g/kg-bw组雌性大鼠的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)均极显著高于对照组(P0.01),0.5g/kg-bw和1.5g/kg-bw组甘油三酯(TG)浓度显著低于对照组(P0.05)雄性大鼠各剂量组日增重和饲料利用率均极显著低于对照组(P0.01);1.0g/kg·bw组雄性大鼠的肝脏鲜重极显著低于对照组(P0.01),1.5g/kg-bw组大鼠的肝脏、肾脏和睾丸鲜重均极显著低于对照组(P0.01);0.5g/kg-bw和1.Og/kg-bw组肝脏相对重量极显著高于对照组(P0.01),各剂量组肾脏和睾丸的相对重量极显著高于对照组(P0.01);0.5g/kg-bw和1.0g/kg-bw组雄性大鼠的中间细胞和粒细胞数均极显著高于对照组(P0.01);雄性大鼠处理组的ALT极显著高于对照组(P0.01),肌酐(Cr)浓度和白蛋白浓度(ALB)显著高于对照组(P0.05),1.5g/kg-bw组尿素氮浓度显著高于对照组(P0.05)。
  结果表明:γ-PGA属于无毒级,但是,长期摄入量超过0.5g/kg·bw会对大鼠机体生长和脏器会产生危害。

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