湖北省烟草蚀纹病毒病调查及毒源检测

摘要

烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus，简称TEV)属马铃薯Y病毒科（Potyviridae）马铃薯Y病毒属(Potyvirus），病毒粒体呈弯曲线状，是世界性分布的病毒，其寄主范围较为广泛，可侵染19个科120余种双子叶植物，其中对重要经济作物烟草带来巨大经济损失。目前，我国陕西、河南、山东等地均有TEV发生的报道。近年来，湖北烟草产区某些烟草品种疑似蚀纹病发生较为普遍，由于本病在我省尚无报道，为进一步确证引起该病的毒源，本文在对病害发生危害进行调查的基础上，从不同地区采集标样，在室内通过血清学、电镜技术、分子生物学等方法进行了毒源鉴定。
　　 本研究主要内容包括：⑴烟草蚀纹病的发生危害:2011～2012年分别对我省十堰、襄阳、宜昌和恩施主要烟草产区蚀纹病发生危害进行了实地调查。结果显示，本病在不同烟草品种上均有不同程度发生。一般发病率为12.7％～17.3％，高的为22.9％～27.2％，最低为3.6％～4.3％。发病叶片发现密布的褪绿斑点和蚀刻症状，严重时出现穿孔或叶枯死。⑵病组织超薄切片:对采集的典型发病标样，按超薄程序进行病组织切片，经透射电镜观察，感病组织细胞中可见“风轮状”内含体和线状病毒粒体存在。⑶血清学检测:从我省不同烟草产区，采集的383份标样，通过双抗体夹心酶联免疫法(DAS-ELISA)检测结果显示，不同产区的样本受侵染情况存在差异，其中十堰和襄阳TEV检出率分别为51.1％和51.4％，宜昌和恩施标样TEV检出率分别为29.4％和5.0％。另外，不同类型的烟草受侵染情况也不相同，烤烟TEV检出率为39.2％，白肋烟TEV检出率为21.6％，马里兰烟TEV检出率为21.1％。⑷分子生物学检测:采用特异性引物进行RT-PCR反应，获得了TEV大小为789bp的特异性目标条带，与相关报道的目标条带大小一致。根据本病田间症状表现和室内鉴定结果，初步证明烟草蚀纹病在我省的发生危害。本文仅是对烟草蚀纹病的毒源进行了一般鉴定，有关该病的发生规律及防治等方面的工作尚待进一步研究。

目录

声明

摘要

1．文献综述

1．1 烟草蚀纹病的发生、分布与危害

1．2 烟草蚀纹病的基本特性和研究进展

1．3 植物病毒常用的检测技术

1．3．1 生物学检测法

1．3．2 电子显微镜检测法

1．3．3 血清学检测法

1．3．4 分子生物学检测法

1．4 湖北省烟草种植概况

1．5 研究目的和意义

2．材料与方法

2．1 材料

2．1．1 烟草病毒病样本

2．1．2 电子显微镜检测材料

2．1．3 血清学检测材料

2．1．4 分子生物学检测材料

2．2 方法

2．2．1 采集样本的保存

2．2．2 烟草蚀纹病的田间调查

2．2．3 电子显微镜检测法

2．2．4 血清学检测法

2．2．5 分子生物学检测法

3．结果与分析

3．1 烟草蚀纹病发生危害调查

3．1．1 烟草蚀纹病的田间症状

3．1．2 烟草蚀纹病的田间发病情况

3．2 烟草蚀纹病的毒源鉴定

3．2．1 血清学检测结果

3．2．2 电子显微镜检测结果

3．2．3 分子生物学检测结果

4．小结与讨论

5．展望

参考文献

附录

致谢