湖北省蔬菜病毒病田间调查及毒源种类鉴定

摘要

病毒病是蔬菜上的主要病害之一，对其品质和产量造成了很大的影响。为了明确湖北省蔬菜病毒病的发生情况，本研究对湖北省主要的蔬菜生产区进行了病毒病发生情况进行调查，对于毒源种类进行鉴定，并对重要病毒进行遗传变异分析。
　　本研究主要内容包括：⑴2013年至2014年对湖北省武汉市、恩施州利川县、宜昌市长阳县、荆州市、十堰市、黄冈市黄州区等主要蔬菜种植区十字花科、豆科、葫芦科和茄科蔬菜病毒病的发生情况进行调查，结果表明:蔬菜病毒病普遍发生，而且造成了一定的危害，各地区蔬菜病毒病发病率在2％～82％，其中恩施州利川县的蔬菜病毒病发病率较低，在2％-10％之间，其他地区则较高，尤其荆州地区局部田块辣椒病毒病的发病率高达82％;蔬菜感染病毒后主要表现为花叶、皱缩、畸形和矮化等症状，发病比较严重的蔬菜有甘蓝、蚕豆、南瓜、丝瓜、辣椒和黄瓜等。⑵采用血清法和分子生物学的方法对所采集的960份病毒病样品进行检测，检测结果表明:在十字花科蔬菜检测的黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）、菁花叶病毒（Turnip mosaic virus，TuMV）和蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus，BBWV)三种病毒中，TuMV检出率最高，达85.62％，其次是CMV和BBWV，检出率分别为27.88％和9.07％;豆科蔬菜主要检测CMV和BBWV等两种病毒，检出率分别为55.50％和24.61％;茄科蔬菜检测CMV、番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilvirus，TSWV）、BBWV、烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus, TMV）、番茄花叶病毒（Tomato mosaic virus，ToMV）等五种病毒，其中CMV是主要病毒，检出率达32.00％，其次是ToMV和BBWV，检出率分别为25.71％和18.28％，TSWV和TMV未检出;葫芦科蔬菜主要检测CMV、黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottleMosaic virus， CGMMV）等两种病毒，CMV检出率为59.15％，未检出CGMMV。⑶湖北省蔬菜病毒病毒源种类鉴定结果显示:蔬菜病毒病普遍存在复合侵染现象，十字花科蔬菜中主要是CMV和TuMV复合侵染，复合侵染率最高为24.56％，豆科蔬菜中为CMV和BBWV复合侵染，侵染率为10.99％，茄科蔬菜中复合侵染形式中一种为CMV和ToMV复合侵染，侵染率为5.14％，另一种形式是CMV和BBWV复合侵染，侵染率最高为16.00％，而葫芦科蔬菜在检测病毒中没有发现复合侵染现象。⑷我们对所调查的CMV和BBWV进行了遗传变异进行分析，共克隆出21个CMV的CP基因和7个BBWV的Polyprotein基因。CMV CP基因序列同源性在73.9％～99.9％之间，可分为两组，亚组Ⅰ和亚组Ⅱ组内各分离物的同源性分别为91.2％～99.9％和97.7％～99.8％。侵染红菜薹和番茄的CMV既有亚组Ⅰ也有亚组Ⅱ的成员，说明CMV在相同寄主上还是存在遗传变异。BBWV的7个分离物均属于BBWV2组，序列之间的同源性为89.0％～99.8％。

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摘要

缩略语表

第一章 前言

1 蔬菜病毒病的发生与危害

1．1 十字花科病毒病的发生与危害

1．2 豆科蔬菜病毒病的发生与危害

1．3 茄科蔬菜病毒病的发生与危害

1．4 葫芦科蔬菜病毒病的发生与危害

2 湖北省蔬菜种植概况

3 病毒检测技术

3．1 生物学检测

3．2 血清学检测

3．3 电镜检测

3．4 分子生物学检测

4 病毒病的防治方法

5 研究目的和意义

第二章 湖北省蔬菜病毒病发生与危害

1 材料和方法

1．1 材料

1．2 调查方法

1．3 病害样品保存方法

2 结果与分析

2．1 蔬菜病毒病田间调查结果

3 小结与讨论

第三章 蔬菜病毒病毒源种类检测及遗传变异分析

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

2 结果与分析

2．1 dot-ELISA检测结果

2．2 病毒遗传变异分析

3 小结与讨论

参考文献

附录

致谢