声明
摘要
缩略表
第—章引言
1．1水稻花粉的发育机理
1．2雄性不育类型
1．2．1核质互作不育
1．2．2光温敏雄性不育
1．2．3隐性核雄性不育
1．3隐性核不育基因的克隆及功能研究
1．3．1减数分裂相关基因
1．3．2绒毡层发育与降解调控基因
1．3．3花粉壁形成相关基因
1．4雄性不育的应用和前景
1．5受精过程对水稻结实率的影响
1．6糖基水解酶对植物受精的促进作用
1．7本研究的意义
第二章水稻无花粉型雄性不育基因BM1的图位克隆与功能验证
2．1材料与方法
2．1．2雄性不育材料鉴定
2．1．3半薄切片观察
2．1．4扫描电镜分析
2．1．5透射电镜观察
2．1．6 DNA的提取
2．1．7分子标记的选择和设计
2．1．8BM1的连锁分析与定位
2．1．9聚丙烯酰胺凝胶电泳及结果分析
2．1．10候选基因预测及测序分析
2．1．11不同时期花药总RNA的提取
2．1．12 cDNA第一条链的合成
2．1．13遗传转化载体的构建与转化
2．1．14 GUS检测
2．1．16 BM1的转录激活活性鉴定
2．1．17不同时期花药的石蜡切片制作
2．1．18 TUNEL检测
2．1．19 DAPI染色
2．1．20苯胺蓝染色
2．1．21原位杂交
2．2结果与分析
2．2．2突变体bm1花药的表型变异部位与时期
2．2．3雄性不育基因BM1的图位克隆
2．2．4突变体bm1的功能互补实验
2．2．5 CRISPR-Cas9敲除突变体的表型鉴定
2．2．6 BM1表达谱分析
2．2．7 BM1的序列分析和系统发育分析
2．2．8 BM1的转录激活活性
2．2．9 BM1对绒毡层降解的调控
2．2．10 BM1与胼胝质降解
2．2．11BM1与雄配子减数分裂
2．2．12野生型与bm1突变体中花药发育相关基因的表达
2．3讨论
2．3．2BM1调控花药绒毡层的适时降解
2．3．3BM1对花药发育相关基因的影响
第三章水稻结实率调控基因LSSR1的反向遗传学研究
3．1材料与方法
3．1．1实验材料与种植
3．1．2 RNA提取、cDNA合成和qRT-PCR
3．1．3系统发育分析
3．1．4亚细胞定位
3．1．6 lssr1突变体株系的表型鉴定
3．1．7共分离分析
3．1．8正反交实验
3．1．9花粉管体内萌发与延伸
3．2结果与分析
3．2．1LSSR1的表达谱分析
3．2．2 LSSR1的基因结构和蛋白序列分析
3．2．3 LSSR1在烟草瞬时表达系统中的亚细胞定位
3．2．4 lssr1突变体株系的构建与其突变表型的鉴定
3．2．5 lssr1突变体株系的受精过程受阻
3．2．6 W216对LSSR1的功能具有重要作用
3．3讨论
3．3．2植物受精过程的调控
3．3．3细胞壁水解酶促进花粉管的穿透
3．3．4 LSSR1上的功能位点分析
3．3．5水稻GH5家族的功能
3．3．6LSSR1与BM1的异同
4．1全文总结
4．1．2结实率调控基因LSSR1的研究总结
4．2展望
4．2．2LSSR1的后续研究
参考文献
附录
致谢
