声明
摘要
缩略语表
1前言
1．1维生素E的重要性
1．2生育酚在植物中的作用
1．2．1生育酚对种子储存、萌发的影响
1．2．2生育酚对光合组织的影响
1．3维生素E的合成途径
1．3．1玉米中生育酚的上下游合成途径
1．3．2玉米中植基二磷酸(phytyl-PP)的合成途径
1．4 QTL克隆
1．4．1连锁分析定位QTL
1．4．2关联分析定位QTL
1．5本研究的背景、目的和意义
2．材料与方法
2．1实验材料与田间实验
2．2生育酚提取和测定
2．2．1生育酚的提取
2．2．2液相色谱条件设定
2．2．3生育酚测定的标准曲线的建立
2．3RIL群体籽粒生育酚含量的QTL连锁分析
2．4表型数据的统计与分析
2．5 QTL初步定位
2．6 qVE5在NIL中的遗传效应检测与精细定位
2．7超表达载体的构建和转基因表型的测定
2．8亚细胞定位
2．9进化树分析
2．11 ZmPORB2在关联群体中重测序
2．12基因的表达分析
2．13叶绿素及其代谢物的测定方法
2．13．3植醇(phytol)的测定方法
2．13．4叶绿素酸酯a和脱镁叶绿酸a的测定
2．13．5叶绿素及其代谢物的标准曲线的建立
2．14 RNA-seq分析方法
3结果与分析
3．1 RIL群体表型分析
3．2 RIL群体五号染色体上的qVE5定位结果
3．3 qVE5的精细定位
3．4ZmPORB2转基因的阳性单株的筛选和表型鉴定
3．5 ZmPORB2的亚细胞定位
3．6 PORs基因家族分析
3．7ZmPORBs的表达分析
3．8ZmPORBs对长短光照的反应
3．9候选基因关联分析
3．10植株的光合组织影响了籽粒的生育酚含量
3．11授粉后ZmPORB2表达量和叶片表型
3．12授粉后叶片叶绿素相关的代谢物的测定和生育酚合成关键基因的表达量检测
3．13 RNA-seq分析
4讨论
4．1连锁分析与关联分析相结合快速克隆基因
4．2ZmPORB2的功能以及如何影响籽粒生育酚含量的合成
4．3 ZmPORB2育种价值和应用
参考文献
附录
致谢
