双核过渡金属配合物由水解途径断裂DNA

摘要

该文探讨了一系列含有铁、锌或铜的双核过渡金属配合物在生理条件下(37℃,pH7)断裂质粒DNA的生物活性.对所有研究的含有双核铁、双核锌及双核铜的配合物促进DNA双链水解断裂的反应性进行比较,我们发现要有效地水解断裂DNA双链,对DNA骨架的磷酸基氧原子有一定配位作用的双核金属离子是必要的,因为两个金属离子间存在协同作用,这与有关的天然酶类似.能够水解断裂DNA的双核金属配合物的配体都具有芳香环和多胺骨架,它们与DNA的结合作用和DNA断裂活性随着pH降低,即配体质子化程度加大而增强,说明带正电的质子化配体和带负电的DNA磷酸二酯骨架间的静电作用以及疏水作用可能也有重要意义.而带负电的配体导致其配合物不能与DNA有效地结合,故更不可能促进DNA水解断裂.控制双核过渡金属配合物促进DNA水解断裂的生活活性的主要因素既不是金属离子的Lewis酸性,也不是其水解反应速率,而是由双核配合物自身的结构因素决定的.双核金属离子间是否存在能质子化为亲核进攻试剂氢氧基的氧合桥、第一配位层中是否有动力学上易于取代的阴离子配体及金属离子是否配位不饱和,这三个因素是双核过渡金属配合物能否作为DNA水解反应的有效催化剂使用的关键.

目录

摘要

Abstract

第一章综述

1.1选题立论依据及意义

1.2 DNA与金属离子的相互作用

1.3核酸酶

1.4人工核酸识别及断裂试剂

1.5 DNA的水解断裂

第二章双核过渡金属配合物与DNA相互作用的光谱研究

摘要

1.1引言

1.2实验部分

1.2.1试剂和仪器

1.2.2实验方法

1.2.3数据处理

1.3结果与讨论

1.31双核过渡金属配合物与DNA的结合

1.32双核过渡金属配合物对DNA热稳定性的影响

1.33 DNA猝灭双核过渡金属配合物的荧光

小结

第三章双核过渡金属配合物由非氧化还原途径断裂DNA

摘要

3.1引言

3.2实验部分

3.21试剂和仪器

3.22实验方法

3.3结果与讨论

3.31各种双核过渡金属配合物断裂pBR322DNA的活性比较

3.32反应条件过双核金属配合物水解DNA活性的影响

3.33 DNA断裂产物的HPLC分析

3.34双核过渡金属合物的DNA的结合作用与DNA的非氧化性断裂

3.35双核过渡金属配合物的DNA水解断裂活性对配合物组成的依赖性

3.36双核过渡金属配合物与天然紫色磷酸酯酶、核酸酶及其衍生物比较

小结

第四章DNA断裂产物的酶学操作

摘要

4.1引言

4.2实验部分

4.21试剂和仪器

4.22实验和方法

4.3结果与讨论

4.31连接实验

4.32限制酶谱分析

4.33双核过渡金属配合物与DNA结合的足迹分析

小结

第五章本文的主要创新点

参考文献

1998-2000期间正式发表及已经投稿、正在投稿中的工作

致谢