蝙蝠葛碱对乙酰胆碱酯酶活性及淀粉样蛋白诱导的SH-SYSY细胞凋亡的影响

摘要

蝙蝠葛碱(Dauricine,Dau)是从中药北豆根中提取的活性成分.北豆根为防己科植物蝙蝠葛(Menispermum dauricum DC.)的根茎,性寒、味苦,习用为清热、解毒、消肿止痛.蝙蝠葛碱是从北豆根中提取的脂溶性生物碱混合物的主要有效成分,另一种主要成分为蝙蝠葛苏林碱(Daurisoline),从化学结构来说二者均为双苄基异喹啉生物碱.国内外学者对蝙蝠葛碱进行了大量研究,发现其具有广泛的药理作用.其在心血管系统方面的活性得到最多的研究,具体而言,有以下几点:(1)抗心律失常作用Dau能显著延长心肌的动作电位时程APD和有效不应期ERP;(2)心肌保护作用Dau可扩张冠脉、增加心肌血流,从而改善心肌缺血缺氧状态;<'(1)>(3)抗血小板聚集Dau能明显抑制二磷酸腺苷ADP、花生四烯酸和胶原诱导的家兔体内外血小板聚集;<'(2)>(4)抗氧化活性何丽娅等研究发现Dau能明显降低大鼠海马结构中丙二醛MDA含量,显著提高超氧化歧化酶SOD活力和谷胱苷肽过氧化物酶GSH-PX活力,且SOD/MDA比值和GSH/MDA比值显著升高<'(3)>.在汤慧芳的学位论文里,研究显示编蝠葛碱能改善D-半乳糖引起的小鼠脑部过氧化状态.<'(4)>在杨毅梅博士的学位论文里,亦显示以Dau为主要成分的蝙蝠葛酚性碱能降低缺氧引起的心肌细胞乳酸脱氢酶LDH露出、胞内MDA增加和胞内NO的生成,并使SOD含量恢复至正常值,作者认为酚性碱通过直接清除氧自由基和提高抗氧化酶活性两方面发挥了其抗氧化活性.<'(5)>此外王芳等也证实蝙蝠葛酚性碱能通过减轻脂质过氧化程度及提高SOD活性发挥对心脑缺血再灌注损伤的保护作用;<'(6)>(5)钙拮抗作用蝙蝠葛碱及其同类生物碱是一新型钙拮抗剂,其作用较经典钙拮抗剂弱,作用持续时间短,可阻断L型钙通道,<'(7,8)>此外,对心肌肌浆网的Ca<'2+>-ATP酶也有轻度抑制作用,可使肌浆网的钙摄取率下降<'(9)>;(6)其它作用研究还发现Dau具有抗炎镇痛作用、免疫调节作用、抗变态反应作用.该课题的第一部分旨在测试蝙蝠葛碱对乙酰胆碱酯酶活性的影响.在王砾的学位论文里,曾以胆碱能受体拮抗剂东莨菪碱(Scopolamine)复制了小鼠化学性记忆障碍模型,并发现蝙蝠葛碱能明显改善这种记忆障碍.<'(10)>然后,基于以下两点:(1)如前述,现有研究表明蝙蝠葛碱具有多种神经药理活性,如抗氧化活性、调节神经细胞钙离子稳态(也即钙离子拮抗作用)<'(10)>;(2)氧化应激和钙离子稳态失衡涉及淀粉样蛋白诱导的神经细胞凋亡.故设计了第二部分及第三部分试验以分别探讨蝙蝠葛碱对Aβ1-42诱导的人成神经细胞瘤细胞株(human neuroblastoma cells,SH-SY5Y cells)凋亡的影响及对SH-SY5Y细胞凋亡时[Ca<'2+>]I和caspase-3活性的影响,以明确蝙蝠葛碱对神经细胞有否保护作用及其发挥保护作用的可能环节.

目录

前 言

第一部分蝙蝠葛碱对对大鼠纹状体和皮层乙酰胆碱酯酶活性的影响

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分蝙蝠葛碱对Aβ1-42诱导的SH-Y5Y细胞株凋亡的影响

摘要

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分蝙蝠葛碱对SH-Y5Y细胞株凋亡时[Ca2+]i及caspase-3活性的影响

摘要

材料与方法

结果

讨论

参考文献

综 述

附 图

致 谢