化学发光法用于环境及生物样品的分析测定

摘要

近年来，化学发光分析法以其灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、操作方便、分析快速和容易实现自动化等优点，而成为分析化学中一个十分活跃的研究热点。本文结合流动注射-化学发光，毛细管电泳-化学发光等联用技术，对化学发光法应用于环境和生物样品中的分析测定进行了探讨，主要内容如下：（1）根据铅(Ⅱ)催化K3[Fe(CN)6]氧化Luminol产生化学发光的事实，结合流动注射分析技术，建立了一种发光定量测定铅的新方法。实验结果表明，该方法对Pb(Ⅱ)的检出限为3.8×10-7mol/L，工作曲线线性范围为1.0×10-6～1.0×10-4mol/L，测定浓度为1.0×10-5mol/L铅(Ⅱ)的相对标准偏差为3.5﹪(n＝11)，通过对汽油样品中铅的检测，结果满意。（2）根据儿茶酚胺及儿茶酚淬灭铁氰化钾-鲁米诺体系发光的原理，利用毛细管电泳-化学发光联用技术分离测定了三种儿茶酚胺和儿茶酚，并优化了检测和分离条件。在最佳条件下，测得多巴胺、肾上腺素、去甲肾上腺素和儿茶酚的检测限分别为0.33μM，1.8μM，2.4μM，0.12μM。本方法具有一定的选择性，对于医用注射液及尿样的分离分析，不需要繁琐的预处理程序，且结果令人满意。（3）在碱性条件下，某些氨基酸和蛋白质具有能显著增强鲁米诺-铁氰化钾体系化学发光信号的特性。基于这一发现，以L-精氨酸和胃蛋白酶为分析对象，研究了毛细管电泳-化学发光联用技术直接分离测定氨基酸和蛋白质的可能性。讨论了化学发光实验条件和电泳条件，得出在优化条件下，L-精氨酸和胃蛋白酶的检测限分别为1.3×10-4M和7.1×10-7M。该方法简单，不需要复杂的衍生步骤，为生物样品中氨基酸和蛋白质的分析测定提供了一种简单有效的方法。