N-乙酰半胱氨酸对苯诱发小鼠再障的拮抗作用研究

摘要

第一部分 建立苯诱发小鼠再障模型的方法探讨 目的：探讨建立苯诱发小鼠再生障碍性贫血(再障)模型的方法。方法清洁级雄性CD1小鼠140只，10只为正常对照组，余小鼠随机分成5组，每组26只，A组为玉米油对照组，每只皮下注射玉米油4ml/kg体重，一周三次，B组为造模组，按给苯剂量不同分为B1组(0.5ml/kg)、B2组(1.0ml/kg)、B3组(1.5ml/kg)、B4组(2.0ml/kg)，各组均以玉米油补足至4ml/kg体重，注射方法同对照组；分别于注射10、15、20、25次后，称重动物，取眶血计数白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板和网织红细胞绝对值及外周血白细胞分类；处死小鼠，取一侧股骨，制备骨髓单细胞悬液，计数后行CFU-GM测定；取另一侧股骨做骨髓涂片检查；取一根胫骨、肝和脾，做病理形态学观察。 结果：(1)A组注射玉米油后的各项指标与正常组对比无显著差异(2)与A组相比，B组小鼠有多项指标呈不同程度下降趋势，其中B4组小鼠在给苯25次后全部指标均下降，与A组比有显著性差异，体重和脾脏指数分别比A组下降18.51％、63.86％(p＜0.01)，白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、网织红细胞绝对值和骨髓有核细胞数分别下降74.97％(P＜0.01)、41.66％(P＜0.01)、30.96％(P＜0.01)、24.77％(P＜0.05)、41.47％(P＜0.05)和61.61％(P＜0.01)，其中以白细胞下降最早且最明显；CFU-GM计数减少32.28％(P＜0.01)；骨髓涂片检查和病理形态学观察均显示造血细胞减少，脂肪细胞和淋巴细胞等非造血细胞增加。 结论： 1.通过予CD1小鼠皮下注射2ml/kg体重的苯，每周三次，累计给苯25次，可成功建立苯诱发小鼠再生障碍性贫血模型。 2.外周血白细胞下降最早且最明显，可作为早期监测苯的血液学毒性的理想指标。 第二部分 N-乙酰半胱氨酸对苯诱发小鼠再障的拮抗作用初探 目的：验证苯诱发小鼠再生障碍性贫血模型的可重复性，初步探讨NAC对苯诱发小鼠再生障碍性贫血的拮抗作用及其机制。 方法：CD1小鼠60只，随机分成4组，A组10只，为玉米油对照组，单纯皮下注射玉米油4ml/kg，每周三次，共25次；B组10只，为NAC对照组，口服NAC400mg/kg/d；C组20只，为再障组，按第一部分B4组的方法复制再障动物模型；D组20只，为NAC干预组，在C组的基础上，口服NAC400mg/kg/d。按本研究第一部分的方法分别处理各组小鼠并检测相关指标。另取部分肝脏，分别测定活性氧、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)和巯基(-SH)的活性或水平。 结果：(1)A组与B组相比较，各项再障模型相关指标无显著差异。(2)C组小鼠各造模指标全部下降，与A组比有显著性差异，提示再障模型复制成功；(3)D组与C组相比，除血小板计数无显著性差异外，其他各项造模指标均有明显改善，WBC(p＜0.05)，RBC(p＜0.01)，HB(p＜0.05)，RET(p＜0.05)，提示NAC对苯的血液学毒性有一定的预防作用；(4)与A组相比，C组D组各氧化指标均显著增高，其中C组与A组相比活性氧(p＜0.01)、MDA(p＜0.01)、T-AOC(p＜0.05)、SOD(p＜0.01)、CAT(p＜0.01)，GSH含量无明显变化，-SH下降(p＜0.01)；D组与A组相比活性氧(p＜0.05)、MDA(p＜0.01)、T-AOC(p＜0.05)、SOD(p＜0.01)、CAT(p＜0.01)，GSH含量升高(p＜0.01)，-SH含量无显著变化。(5)D组与C组相比各氧化指标均显著降低，活性氧(p＜0.01)、MDA(p＜0.01)、T-AOC(p＜0.05)、SOD(p＜0.01)、CAT(p＜0.01). 结论： 1.本实验建立苯诱发小鼠再障模型的方法可重复性好，有一定的实用价值。 2.苯诱发再障的机制中有氧化损伤作用的参与。 3.NAC在小鼠体内一定程度上减轻了苯的血液学毒性，其中NAC的抗氧化作用是一个重要因素。

目录

前言

第一部分建立苯诱发小鼠再障模型方法的初步探讨

第二部分N-乙酰半胱氨酸对苯诱发小鼠再障拮抗作用的初步探讨

结论

参考文献

附图

综述（一）苯的血液学毒性及相关疾病动物模型制作的研究

综述（二）N-乙酰半胱氨酸对细胞保护作用的研究进展

致谢