Nogo-A对磷酸化蛋白激酶B在PC-12细胞表达的影响

摘要

目的：用Nogo-A干预分化后的PC-12细胞，观察其细胞内磷酸化蛋白激酶B(protein kinaseB，PKB)表达情况，探讨Nogo-A抑制中枢神经再生的信号转导通路中是否有PKB的参与。 方法：将培养的细胞分成三组。对照组1：PC-12细胞经高糖型DMEM完全培养基培养12天；对照组2：PC-12细胞经含神经生长因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培养液培养10天后，高糖型DMEM完全培养基培养2天；试验组：PC-12细胞经含神经生长因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培养液培养10天，高糖型DMEM完全培养基培养2天后，加入Nogo-A干预。实验组又分别根据加入Nogo-A的浓度和干预时间分2个小组。实验组1分别加入50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L终浓度的Nogo-A干预30min，实验组2加入200nmol/L终浓度的Nogo-A分别干预10min,30min,90min。应用蛋白印迹方法检测Nogo-A干预后细胞内磷酸化PKB的表达。 结果：与对照组相比较，Nogo-A干预后的PC-12细胞内磷酸化PKB水平明显增高。 结论：Nogo-A抑制中枢神经再生的信号转导通路中有PKB的参与。但是Nogo-A通过此通路抑制神经再生的受体是否为NgR1，激活PKB的上游信号分子是PI3K依赖途径还是PI3K非依赖途径等问题都有待进一步研究。