当归多糖不同提取工艺对合成当归多糖铁复合物影响的研究

摘要

当归多糖铁复合物（Angelica Sinensis polysaccharide iron complex，APIC）是本课题组以分子量均一当归多糖（Angelica Sinensis polysaccharide，ASP，含量99％）为原料合成的一种新型的具有双重补血作用的补铁剂。为简化APIC的制备工艺，得到理化性质稳定的APIC，本文对当归多糖提取工艺进行研究并以实验室合成的APIC标为参照，研究不同工艺提取当归多糖对合成APIC的影响。 一、当归多糖提取工艺的研究 本部分实验主要对当归多糖的四种提取工艺即水提醇沉法、酸提醇沉法、碱提醇沉法、超声醇沉法进行研究。水提醇沉法提取当归多糖的工艺研究中对水提条件加水量、提取次数、浸泡时间进行正交设计，优选出了最佳的水提条件为当归浸泡60min加8倍量的水，水浴回流120min水提一次；水提醇沉法对醇沉条件乙醇浓度、浓缩液密度等条件进行正交设计，优选出了最佳醇沉条件为水提液浓缩至1：1.8（当归药材/提取液体积）加95％乙醇至醇浓度为65％。酸提醇沉法提取当归多糖研究主要考察酸浓度对提取当归多糖的影响，确定了酸的浓度为0.3 mol?L-1。碱提醇沉法提取当归多糖研究主要考察碱浓度对提取当归多糖的影响，确定碱的浓度为0.5 mol?L-1。超声法提取当归多糖的研究中考察了超声时间对提取当归多糖的影响，确定了提取时间为60min。 对不同工艺提取的当归多糖进行了理化性质的比较。结果表明四种工艺提取当归多糖产量为（15.33±6.21）g、糖含量为（33.29±3.94）％。同时实验结果表明碱提醇沉法不适合当归多糖的提取。紫外光谱和红外光谱分析结果表明三种工艺提取的当归多糖均显示多糖的特征吸收；凝胶色谱分析提示三种工艺提取的当归多糖均由两个洗脱峰组成，但两部分的比例不同。 二、不同工艺提取当归多糖对合成APIC影响的研究 以三种不同提取工艺得到的当归多糖为原料合成三种APIC，参照本课题组以含糖量为99％当归多糖合成的APIC标，对三种APIC的理化性质进行比较。 采用置换碘量法测定三种APIC的铁含量；采用硫酸-苯酚法测定三种APIC的糖含量；对三种APIC的紫外光谱和红外光谱进行了分析和比较；采用水解实验和热失重实验对三种APIC稳定性进行考察；采用SephacrylS-300对三种APIC进行凝胶色谱分析。 结果表明APIC的铁含量为（29.08±2.06）％，糖含量为（11.57±0.73）％；紫外光谱和红外光谱分析结果表明APIC标和三种APIC图谱相似，均显示多糖的特征吸收峰，均不含蛋白质；水解实验表明APIC标和三种APIC在PH 6-12 范围内性质稳定，不发生水解，无沉淀产生；热稳定性分析表明APIC标和三种APIC在600℃内总失重为40％。APIC标和三种APIC经SephacrylS-300洗脱后分成两个组分，两组分的比例存在一定差异。 综合以上研究结果，不同工艺提取的当归多糖对合成APIC在铁含量、糖含量、紫外光谱、红外光谱、稳定性、凝胶色谱洗脱曲线等方面无明显差别，从提取工艺的简单经济角度确定以水提醇沉法提取的当归多糖合成APIC。