钙激活氯通道在变应性鼻炎黏液高分泌中的作用及糖皮质激素的干预

摘要

变应性鼻炎是一种常见的变态反应性疾病，黏液高分泌是其重要临床特征。钙激活氯通道是为数不多的跨膜阴离子通道之一，其家族成员分布广泛。其中人hCLCA1和鼠mCLCA3是异种同源钙激活氯通道蛋白，主要位于气道上皮细胞，在液体和电解质转运、黏液分泌方面起重要作用，被认为在气道黏液高分泌中发挥作用。目前已发现的气道分泌物黏蛋白中，以MUC5AC的变化最为重要，是衡量气道黏液分泌的重要指标。研究显示，hCLCA1和mCLCA3在哮喘气道上皮细胞选择性表达增加，参与气道黏液高分泌的调节，但其在变应性鼻炎中的作用尚未见相关报道。因此，本研究采用RT-PCR法和免疫组化学法，通过探讨钙激活氯通道和黏蛋白在变应性鼻炎鼻黏膜和正常鼻黏膜上皮细胞中的表达及糖皮质激素对黏液高分泌的抑制作用，以期为变应性鼻炎临床治疗提供新的靶点。本课题分为两部分。
　　 第一部分、人钙激活氯通道hCLCA1和黏蛋白MUC5AC在变应性鼻炎中的表达和意义
　　 目的：探讨人钙激活氯通道hCLCA1和黏蛋白MUC5AC在变应性鼻炎黏液高分泌中的表达水平及临床意义。
　　 方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和免疫组化法，检测了20例变应性鼻炎患者和7例正常人hCLCA1和MUC5AC在下鼻甲黏膜的表达水平。
　　 结果：变应性鼻炎鼻黏膜hCLCA1mRNA表达阳性(0.325±0.126)，而对照组未出现hCLCA1mRNA的表达，差异具有统计学意义(P<0.01)；变应性鼻炎组MUC5ACmRNA表达量(0.578±0.104)较对照组(0.261±0.134)明显增多，差异具有统计学意义(P<0.01)；变应性鼻炎组MUC5AC蛋白表达(0.601±0.112)较对照组(0.439±0.147)增多，差异具有统计学意义(P<0.01)；变应性鼻炎组鼻黏膜hCLCA1mRNA表达与MUC5AC的mRNA和蛋白表达均呈直线正相关(r分别为0.752和0.694，P值均<0.05)。
　　 结论：hCLCA1mRNA表达的上调可能在变应性鼻炎黏液高分泌中起着关键作用；抑制hCLCA1的表达将为变应性鼻炎的治疗提供新的策略。
　　 第二部分、糖皮质激素对变应性鼻炎大鼠模型钙激活氯通道的影响
　　 目的：研究变应性鼻炎大鼠模型鼻黏膜钙激活氯通道mCLCA3和黏蛋白Muc5ac的表达及糖皮质激素(地塞米松)对其的影响。方法：30只SD大鼠随机分成变应性鼻炎组、地塞米松干预组和对照组，用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化法分别检测鼻黏膜mCLCA3 mRNA和Muc5ac蛋白的表达。结果：变应性鼻炎组鼻黏膜mCLCA3 mRNA和Muc5ac蛋白表达均较对照组明显增加(P<0.01)，且变应性鼻炎组中mCLCA3 mRNA表达与Muc5ac蛋白的表达呈直线正相关(r=0.813，P<0.05)；地塞米松组中mCLCA3 mRNA和Muc5ac蛋白的表达较变应性鼻炎组均明显减少(P<0.05)。
　　 结论：变应性鼻炎大鼠鼻黏膜mCLCA3基因表达上调与黏液高分泌同时存在，mCLCA3可能在变应性鼻炎鼻黏膜黏液高分泌中起重要作用；糖皮质类激素地塞米松可显著抑制mCLCA3及黏蛋白Muc5ac的合成，为糖皮质激素治疗变应性鼻炎黏液高分泌机制的研究提供新的方向。