膝骨关节炎患者外周血中MMP-3，MMP-9，NF-κB RANKL和NO的表达及中药的治疗作用

摘要

膝关节OA是引起中老年人疼痛和伤残的主要原因之一，严重影响了中老年患者的生活质量，也给家庭和社会带来了医疗负担。本试验的目的是分析膝关节OA软骨的分子代谢活动，并找到其与临床表现的相关性，为发展新的诊断和治疗方法提供一定的理论依据，并深入探讨了芍灵消增贴的疗效机制，为进一步开发新的治疗膝关节OA的中药作出一定的贡献。经过本实验研究，取得了以下成果：
　　 第一、针对膝关节OA早期（I级和II级）的生化特征和临床表现做了较大样本的临床和基础方面的研究，发现两者之间具有一定的相关性；通过研究膝关节OA早期患者体内分子和生化代谢的变化来洞悉其临床方面的改变（包括影像学和症状方面），为发展新的诊断和治疗方法提供了一定的理论依据，为疾病的早期诊断提供了依据。主要研究方法：健康对照组共21例，膝关节OA患者共105例，根据Kellgren和Lawrence标准分为4级，临床症状采用Lequesne指数进行评分，所有实验对象取空腹血清测定MMP-3、MMP-9、NO含量与外周血单个核细胞（PBMC）的MMP-3、MMP-9、RANKL表达；研究结果：在膝关节OA早期（I级），血清MMP-3、MMP-9、NO含量与PBMC的MMP-9和RANKL逆转录表达水平都明显高于健康组和其他各级膝关节OA患者。还发现在早期膝关节OA患者血清MMP-3、MMP-9的浓度与PBMC的MMP-9表达量都与临床症状的严重程度（即Lequesne总指数）成正相关，血清NO的浓度与Lequesne总指数、压痛指数、肿胀指数成正相关，PBMC的RANKL表达量变化也与Lequesne总指数、压痛指数、肿胀指数成正相关。结论 通过本研究我们推测血清MMP-3、MMP-9、NO与PBMC的MMP-9、RANKL可能是膝关节OA早期诊断中一些特异性、高敏感性诊断指标，而关键是当疾病的病理进程还不能通过X线的表现反应出来时，这些指标就能提供给了我们有关疾病的重要信息。而且，通过合适的途径调节这些相关因子和基因的表达，可能会发展新的、有效的治疗手段。
　　 第二、研究证明中药芍灵消增贴对治疗各级膝关节OA具有较好的疗效并探讨了其疗效机理。方法 OA患者共105例，根据Kellgren和Lawrence标准分为4级，治疗2周。治疗前后取空腹血清测定MMP-3、MMP-9、NO含量与PBMC的MMP-3、MMP-9、RANKL表达，并采用Lequense指数作为疗效评分标准，观察治疗前后膝关节症状变化。结果 试验组与对照组血清MMP-3、MMP-9、NO和PBMC的MMP-9、RANKL的表达量基础值均高于健康组；I、II级OA患者中治疗前后血清MMP-3、NO的浓度及Lequesne总指数比较皆有显著性差异，且与Lequesne总指数呈明显正相关；但PBMC中MMP-3治疗前后的表达量的差异无统计学意义，且与Lequesne总指数无明显相关性。I级OA患者治疗后血清MMP-9含量、PBMC的MMP-9的表达量与基础值比较明显下降。治疗后I级OA患者RANKL的表达量与基础值比较明显下降，症状Lequesne总指数也明显下降，两者呈明显相关性。I级、II级、IV级OA患者治疗后肿胀、压痛Lequesne指数明显改善，PBMC中RANKL的表达量与肿胀、压痛Lequesne指数呈明显正相关。结论 芍灵消增贴作用机理可能是通过下调血清NO的浓度，抑制滑膜细胞和软骨细胞中MMP-3基因的表达从而下调血清中MMP-3的浓度，抑制PBMC中MMP-9基因的表达而下调血清中MMP-9的浓度，从而抑制软骨细胞凋亡和软骨基质的降解，达到改善OA早期（I级、II级）临床症状的治疗作用；下调PBMC的RANKL基因的表达量，从而抑制破骨细胞的破骨活动，达到治疗和缓解OA早期、活动期临床症状的目的。