Salusin-α基因真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

摘要

目的：研究增强型绿色荧光蛋白真核表达载体Salusin-a（pEGFP-Salusin-a）的构建及在人胚胎肾细胞系293细胞（HEK293）中的表达。并探讨冠心病患者血浆Salusin-a水平与冠状动脉粥样硬化之间的关系。
　　 方法：连续收集冠状动脉造影证实的冠心病患者92例为研究对象，按临床表现分为稳定型心绞痛(SA)组和急性冠脉综合症(ACS)组；分别测定人血浆Salusin-a水平并进行Genisini评分，分析Salusin-a与冠状动脉粥样硬化之间的关系。提取人单核细胞系THP-1细胞Salusin-a的mRNA，逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）扩增Salusin-a基因，克隆入pEGFP-N3载体，双酶切、菌落PCR及测序鉴定pEGFP-Salusin-a质粒。用脂质体转染pEGFP-Salusin-a入HEK293细胞，分为转染细胞组，质粒对照组和空白对照组检测，分析各组荧光蛋白和Salusin-a基因的表达。
　　 结果：冠心病患者中血浆Salusin-a的水平明显比健康对照组低，且Salusin-a与代表冠状动脉病变程度的Gensini评分呈负相关。成功构建pEGFP-Salusin-a质粒，并转染HEK293，细胞转染效率86％，转染细胞组和质粒对照组绿色荧光蛋白的表达明显高于空白对照组，（p<0.05）；转染细胞组和质粒对照组Salusin-a mRNA的表达高于空白对照组，（p<0.05）。
　　 结论：冠心病患者血浆Salusin-a水平显著降低。重组pEGFP-Salusin-a质粒能转染HEK293细胞并表达Salusin-a，为Salusin-a基因功能的进一步研究提供实验基础。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

一、材料与方法

二、实验结果

讨 论

参考文献

Salusins在心血管系统中的研究进展

致 谢