靶向siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜VEGF和MMP-9表达及血管生成的影响

摘要

目的：利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默β-catenin以阻断Wnt/β-catenin信号通路，观察对子宫内膜异位症（内异症）裸鼠模型异位子宫内膜血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor，VEGF）和基质金属蛋白酶-9（matriXmetalloproteinases-9，MMP-9）表达及血管生成的影响，探讨Wnt/β-catenin信号通路促进异位内膜组织粘附、侵袭和血管生成的作用。
　　 方法：采用人子宫内膜异体移植方法构建子宫内膜异位症（内异症）裸鼠模型，将18只内异症裸鼠随机分为3组（n=6）：siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组，每日分别腹腔注射100μl siRNA转染复合物（含β-catenin siRNA 3 ug和转染试剂7.5 ug）、阴性对照转染复合物（含阴性对照siRNA 3ug和转染试剂7.5 ug）和空白对照组混合液（含转染试剂7.5 ug）一次，共注射5次。末次腹腔注射后24h断颈处死裸鼠，观察盆、腹腔病灶形成情况，取异位病灶标本。Real time RT-PCR和免疫组织化学检测异位内膜组织β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。免疫组织化学检测裸鼠模型异位内膜组织微血管密度（microvessel density，MVD）。
　　 结果：实验裸鼠共20只，18只成模成活。Real time RT-PCR结果显示，与阴性对照组和空白对照组相比，siRNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9表达明显低于阴性对照组和空白对照组（p<0.05），而后两者之间差异无统计学意义(p>0.05)。免疫组化结果显示，siRNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9表达明显减弱，并低于阴性对照组和空白对照组（p<0.05），而后两者之间差异无统计学意义(p>0.05)。siRNA干扰组MVD低于阴性对照组和空白对照组（p<0.05）。
　　 结论：阻断Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制子宫内膜异位症裸鼠模型异位内膜组织VEGF和MMP-9表达及血管生成。从整体水平证实Wnt/β-catenin信号通路可促进异位子宫内膜的粘附、侵袭和血管生成。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

综述1:子宫内膜异位症发病机制与经典Wnt/β-catenin信号通路关系的研究进展

综述2:光学成像技术在子宫内膜异位症动物模型中的应用

附 录

致 谢