诱导pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2对人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1凋亡的影响

摘要

目的：脂质体转染法将pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2质粒转入人眼脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)，研究过氧化氢诱导其表达后对人眼脉络膜黑色素瘤细胞凋亡的影响，探讨pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2自由基诱导特性及其对人眼脉络膜黑色素瘤细胞的杀伤作用。
　　 方法：用脂质体转染法转染人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞，将转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP细胞设为对照组，转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2细胞设为实验组。予以过氧化氢刺激后，荧光显微镜观察两组细胞前后荧光表达变化，MTT法检测两组细胞的增殖状况，Western免疫印迹法比较对照组和实验组Omi／HtrA2以及XIAP蛋白的表达情况，Annexin V-FITC/PI双标后用流式细胞仪观察两组细胞凋亡的改变。
　　 结果：过氧化氢诱导后,实验组、对照组表达荧光细胞数均较诱导前增加，差异有统计学意义（P＜0.05），实验组细胞增殖率较对照组下降，Omi/HtrA2基因表达在蛋白水平较对照组增高53.5％，XIAP蛋白与对照组比较下降31.9％，流式细胞仪分析显示，诱导后，实验组与对照组比较，凋亡率显著增高，差异有统计学意义（p<0.01）。
　　 结论：诱导转染pcDNA3.1-Egr1-EGFP-Omi/HtrA2质粒表达可引起人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞凋亡,可能与Omi／HtrA2蛋白增高引起的XIAP降低有关。

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综述 脉络膜黑色素瘤的放射治疗进展

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