ox-LDL对VSMC表达SDF-1α的影响及其对VSMC和SPC趋化作用的研究

摘要

目的：
　　 1、探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）对小鼠血管平滑肌细胞表达基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的影响；
　　 2、比较VSMC的条件培养液及SDF-1α对血管平滑肌细胞（VSMC）和平滑肌祖细胞（SPC）趋化迁移的影响。
　　 方法：
　　 1、组织块贴壁法培养小鼠主动脉平滑肌细胞，用免疫组织化学方法对培养的平滑肌细胞进行鉴定；
　　 2、ox-LDL与VSMC 共培养，用免疫组织化学方法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定VSMC表达SDF-1α蛋白的变化，用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）测定VSMC表达SDF-1αmRNA的变化，观察剂量-时间效应；
　　 3、趋化迁移实验：将含有趋化因子SDF-1α的培养液置于Transwell 小室下室，将VSMC或SPC 悬液置于其上室，共孵育6h后，乙醇固定，高倍镜下计数滤膜背面（下室面）的细胞数，检测VSMC的条件培养液及SDF-1α对VSMC和SPC的趋化迁移的影响。
　　 结果：
　　 1、培养的小鼠血管平滑肌细胞的纯度可以达到约90％。
　　 2、小鼠血管平滑肌细胞有基础水平的SDF-1α的表达。Ox-LDL的浓度在0～60ng／ml 范围内，作用24h，SDF-1α蛋白的表达随ox-LDL 浓度的增加而变化，SDF-1α蛋白表达的峰值在ox-LDL 浓度为45ng／ml 时，是ox-LDL 浓度为0ng／ml 时的1.4倍。在ox-LDL 浓度为45ng／ml 时，0～48h 范围内，SDF-1α蛋白的表达变化随时间的延长而变化，SDF-1α蛋白表达的峰值在24h，是0h的1.5倍。在ox-LDL 浓度为45ng／ml 时，0～30h 范围内，SDF-1αmRNA的表达变化随时间的延长而变化，SDF-1α基因mRNA的峰值在10h，是0h的3.2倍。
　　 3、VSMC的条件培养液及SDF-1α对VSMC和SPC 都具有明显趋化作用。而且VSMC的条件培养液及SDF-1α对SPC的趋化作用强于对VSMC的趋化作用。
　　 结论：
　　 1.、ox-LDL 可增强小鼠血管平滑肌细胞SDF-1α的表达。
　　 2、VSMC的条件培养液及SDF-1α对SPC的趋化作用明显强于对VSMC的趋化作用。

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材料与方法

结果

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综述CXCR4+干细胞与动脉粥样硬化的研究进展

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