神经酰胺通过Akt1/Foxo3a信号通路诱导卵巢癌细胞自噬及其机制的研究

摘要

目的:
　　 1. 研究神经酰胺(C2-ceramide,Cer)作用下，Beclin1,LC3,Akt1,Foxo3a在卵巢癌细胞中的表达
　　 2. 探讨Cer/Akt1/Foxo3a信号通路在卵巢癌发病机制中的作用。
　　 方法：
　　 1. 应用MTT法检测在不同浓度C2-神经酰胺作用下，卵巢癌细胞的抑制率。
　　 2. 应用FCM法检测不同浓度的C2-神经酰胺作用下，卵巢癌细胞的凋亡率。
　　 3. 应用透射电镜观察在25mmol/L C2-神经酰胺作用下，卵巢癌细胞的自噬溶酶体。
　　 4. 应用实时定量PCR法检测在25mmol/L C2-神经酰胺作用下Beclin1,LC3在卵巢癌细胞中的表达。
　　 5. 应用Western blot法检测25mmol/L C2-神经酰胺作用下，Beclin1,LC3,Akt1,Foxo3a在卵巢癌细胞中的表达。
　　 结果：
　　 1. 随着C2-神经酰胺浓度的增加，对卵巢癌细胞增殖的抑制越来越大，IC50为55.719mmol/L。
　　 2. 卵巢癌细胞的凋亡对C2-神经酰胺具有浓度依赖，但小于25mmol/L C2-神经酰胺几乎不引起卵巢癌的凋亡。
　　 3. 透射电镜观察25mmol/L C2-神经酰胺作用后卵巢癌细胞的自噬溶酶体数量显著增多。
　　 4. 25mmol/L C2-神经酰胺作用后Beclin1,LC3在卵巢癌细胞中mRNA和蛋白水平表达都是增加，LC3蛋白有两个亚基LC3Ⅰ和LC3Ⅱ，LC3Ⅰ,LC3Ⅱ表达都是增加，并且LC3Ⅱ高于LC3Ⅰ。
　　 5. 25mmol/L C2-神经酰胺作用下，p-Akt1（Ser473）蛋白表达减少；Foxo3a蛋白表达增加。
　　 结论：
　　 1. C2-神经酰胺可以通过Akt1/Foxo3a信号通路诱导巢癌细胞自噬性死亡。
　　 2. C2-神经酰胺可活化自噬相关基因Beclin1,LC3。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

第一章 前 言

第二章 材料与方法

第三章 结 果

第四章 讨 论

第五章 结 论

【参考文献】

文献综述神经酰胺的代谢及其介导的自噬途径

致 谢