Livinα重组腺病毒载体感染人DC细胞对A549细胞的体外杀伤效应

摘要

目的：研究人rAd-hlivinαDC疫苗在体外刺激人淋巴细胞产生特异性免疫反应,观察其体外对表达livinα蛋白的肺癌细胞A549的杀伤效应。
　　方法：从新生儿脐带血中分离出单个核细胞,加入细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α培养,得到成熟的树突状细胞(dendriticcells,DCs)。将携带livinα的重组腺病毒(rAd-hlivinα)感染人DCs制备成rAd-hlivinαDC疫苗,以空载腺病毒(rAd)感染人DCs制成的rAd-controlDC疫苗、无负荷DC疫苗作为对照,Wsetern-blot实验检测人肺癌细胞A549、H460、rAd-hlivinαDCs、rAdDCs、淋巴细胞、气道上皮细胞(HBE)的livinα蛋白表达情况;流式细胞仪检测人DCs表面分子CD80、CD86、CD1α、HLA-DR表达的变化;用rAd-hlivinαDC疫苗、rAd-controlDC疫苗、无负荷DC疫苗在体外刺激人同源淋巴细胞,产生特异性免疫反应,观察其体外对表达livinα蛋白的人肺癌A549细胞的杀伤效应。
　　结果：1.人肺癌细胞A549、H460、rAd-hlivinαDCs表达livinα蛋白,而人淋巴细胞、rAdDCs、气道上皮细胞(HBE)不表达。
　　2.人rAd-hlivinαDCs、rAdDCs细胞表面分子表达水平较人DCs高。
　　3.实验组人rAd-hlivinαDC疫苗组与对照组无负荷DC疫苗、rAdDC疫苗组杀伤率有极显著性差异(单因素方差分析,P<0.01)。两个对照组无负荷DC疫苗、rAdDC疫苗组之间杀伤率无显著性差异(单因素方差分析,P>0.05)
　　结论：1.重组腺病毒载体可上调人DCs表面分子的表达。
　　2.Livinα重组腺病毒载体感染人DCs细胞(rAd-hlivinαDC疫苗)在体外对表达livinα蛋白的人肺癌A549细胞有明显杀伤作用。

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结 论

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