串联黄色荧光蛋白在大鼠神经细胞中表达

摘要

神经连接组学是一门新兴学科,是研究和绘制出大脑神经细胞连接(即突触)的图谱。神经连接组学要解决的首要问题是神经细胞的高亮度和高精度标记,以致于成像设备能采集到树突棘和轴突末梢。本课题组探索神经细胞的分子标记技术。为了实现高亮度标记,构建了多种串联黄色荧光蛋白质粒;为了实现标记树突棘,构建了带有定位序列的荧光蛋白质粒。作者将在培养的神经细胞中鉴定这些质粒是否能实现目的。
　　人们已经建立了胎鼠神经细胞的体外培养方法,作者获得了多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒。课题的目的是观察多种荧光蛋白质粒在神经细胞中的表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒在神经细胞中的表达。实验探索是否荧光蛋白的亮度提高,是否荧光蛋白在神经纤维中表达。通过查阅文献和练习,借鉴本实验室胎鼠神经细胞体外培养方法,掌握了神经细胞的体外培养方法,培养了神经细胞,获得了生长状态良好的神经细胞。通过查阅文献,采用脂质体转染神经细胞的方法,转染了Hela细胞和神经细胞,使用荧光显微镜观察荧光蛋白表达情况。结果观察到神经细胞和Hela细胞表达荧光蛋白,观察到荧光蛋白定位于神经细胞突起上的纤维状结构,表明多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒在离体培养的神经细胞中正常表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒能在神经细胞突起上的纤维状结构中表达。本文结论多种黄色荧光蛋白质粒和带有定位序列的荧光蛋白质粒可能在神经细胞中正常表达,带有定位序列的荧光蛋白质粒可能能标记神经细胞突起上的纤维状结构。

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1 绪 论

1.1 总结嗅觉通路标记技术

1.2 简介荧光蛋白应用

1.3 论文研究的主要内容

2 神经细胞的培养

2.1 材料与仪器

2.2 实验方法与操作

2.3 实验结果

2.4 讨论

3 串联黄色荧光蛋白重组质粒在神经细胞中的表达

3.1 材料

3.2 方法，结果

3.3 讨论

4 串联黄色荧光蛋白重组质粒在神经细胞中的定位表达

4.1 材料

4.2 方法，结果

4.3 讨论

5 总结与展望

5.1 总结

5.2 展望

致谢

参考文献