透明质酸合成酶基因家族在肾癌中的差异表达及其临床意义

摘要

目的:研究透明质酸合成酶家族基因(HAS1、HAS2、HAS3)在肾癌中的表达,并探讨其潜在的临床意义。
　　方法:运用实时定量聚合酶链反应(qPCR)方法检测五种肾癌细胞系(ACHN、CAKI-I、OS-RC-2、786-O、SN12PM6)及正常人肾小管上皮细胞(HK-2)中透明质酸合成酶三种亚型(HAS1、HAS2、HAS3)mRNA的表达,运用Westernblot及免疫组化方法进一步检测其在五种肾癌细胞系及肾透明细胞癌(ccRCC)组织中的蛋白表达。
　　结果:HAS2mRNA在五种肾癌细胞系中的表达水平均高于正常肾小管上皮细胞(HK-2),其中在肾癌SN12PM6细胞系中表达水平最高(P<0.05),HAS1mRNA的表达水平均明显低于正常HK-2细胞(P<0.05),而HAS3mRNA表达水平除肾癌CAKI-I细胞系外均低于正常HK-2细胞(P<0.05)。HAS2在五种肾癌细胞系中的蛋白表达均明显高于HK-2(P<0.05),而HAS1及HAS3在五种肾癌细胞系中的蛋白无明显表达。在肾透明细胞癌组织中HAS2蛋白表达也高于相应癌旁组织,其阳性表达率分别为85％(17/20)、20%(4/20),其差异有统计学意义(P<0.005),并且与肾癌分级及临床分期有关。而HAS1在癌组织及癌旁组织中阳性表达率分别为30%(6/20)、40%(8/20),HAS3阳性表达率分别为35%(7/20)、20%(4/20),两者在癌组织与癌旁组织的阳性表达率比较均无统计学差异(P>0.05)。
　　结论:透明质酸合成酶基因家族三种亚型(HAS1、HAS2、HAS3)在肾癌细胞系及肾透明细胞癌组织中呈现差异性表达。其中HAS2在肾癌细胞系和肾透明细胞癌组织中均异常高表达,而HAS1及HAS3表达水平较低,提示HAS1及HAS3在肾癌中并不发挥某种作用或作用很小,相反HAS2可能作为优势亚型在肾癌发生发展过程中起着至关重要的某种作用,并可能成为肾癌新的分子标志物以及成为肾癌靶向治疗的潜在靶点。

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中文摘要

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前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1. 细胞qPCR结果

2. 细胞Western blot结果

3．组织Western blot结果

4. 组织免疫组化结果

讨论

结论

附表

参考文献

综述

参考文献

附录

致谢