IL-6联合G-CSF通过调控中性粒细胞的脱颗粒功能诱导其产生促瘤活性

摘要

目的:探讨正常以及荷瘤小鼠骨髓中性粒细胞对肿瘤生长的影响,以及造成这种影响的调控因素。
　　方法:(1)用密度梯度离心的方法分离小鼠骨髓中的中性粒细胞,建立肿瘤细胞与PMN混合接种动物模型,观察正常组骨髓PMN和荷瘤鼠骨髓PMN对肿瘤生长的影响;(2)构建IL-6、G-CSF以及IL-6和G-CSF受体的真核表达载体,观察在肿瘤细胞与PMN混合接种动物模型中,在不荷瘤的情况下表达这两种细胞因子以及在荷瘤情况下阻断这两种细胞因子时PMN对肿瘤生长的影响;(3)用肌肉部位转染表达趋化因子真核表达载体的方法,建立体内趋化PMN至肿瘤部位模型,观察不同处理组PMN对肿瘤生长的影响;(4)在小鼠腹腔转染表达趋化因子,将PMN募集到腹腔,Percoll分离腹腔PMN,获得完成趋化过程但尚未进入肿瘤微环境与之发生反应的PMN,与肿瘤细胞混合接种,观察正常小鼠、荷瘤小鼠以及不荷瘤但在肌肉局部表达IL-6和G-CSF的小鼠骨髓细胞对肿瘤生长的影响。
　　结果:(1)正常小鼠骨髓PMN抑制肿瘤生长,而荷瘤小鼠骨髓PMN促进肿瘤生长;(2)IL-6联合G-CSF能够改变小鼠骨髓PMN的抑瘤作用,使其具有促进肿瘤生长的作用,在荷瘤小鼠中同时阻断IL-6和G-CSF的表达可以消除荷瘤小鼠骨髓PMN的促进肿瘤生长作用;(3)这种改变不受体内趋化过程的影响,在PMN进入肿瘤微环境之前得以保持;(4)趋化至腹腔的荷瘤小鼠PMN保持了这种促瘤功能,局部转染表达了IL-6和G-CSF真核表达载体的小鼠腹腔PMN同样也能促进肿瘤生长。证明G-CSF和IL-6的确可在PMN进入肿瘤微环境之前其抑瘤功能转变成为促瘤功能。
　　结论:肿瘤对于PMN的作用开始于骨髓PMN细胞,在肿瘤细胞分泌的众多细胞因子中,IL-6联合G-CSF作用于小鼠骨髓中PMN,在进入肿瘤微环境之前就调控了PMN的功能,使其抑瘤功能转变成为促瘤功能。

目录

封面

声明

目录

主要缩略词表

主要仪器和器材

中文摘要

英文摘要

第一部分IL-6联合G-CSF在骨髓中调控中性粒细胞使其具有促进肿瘤生长的作用

1. 材料与方法

2. 结果

3. 讨论

参考文献

第二部分IL-6联合G-CSF影响中性粒细胞颗粒物质的合成或释放

1. 材料与方法

2. 结果

3. 讨论

参考文献

第三部分中性粒细胞脱颗粒功能减弱的机制探讨

1. 材料与方法

2. 结果

3. 讨论

参考文献

文献综述

补充材料

致谢