雌激素对不同性别来源肺腺癌细胞效应的差异及机制

摘要

目的：目前研究认为肺腺癌的性别差异有部分原因是由于女性体内基础水平雌激素高于男性，而男、女性肺腺癌对雌激素的反应性是否有差异尚无报道，为了明确雌激素对女性肺腺癌是否有更显著的促进作用以及其可能的机制，在前期研究发现相同水平雌激素体外培养条件下，女性来源的肺腺癌细胞增殖加速，但在男性来源的肺腺癌细胞中并未发现相类似结论这一基础上，从不同性别肺腺癌细胞株对等量雌激素的反应性是否存在显著差异这一方面着手，希望阐明雌激素对不同性别来源肺腺癌细胞效应是否存在差异及可能机制。
　　方法：通过免疫组化检测不同性别人肺腺癌组织中p-ERβ蛋白的表达是否有差异。并通过等量雌激素干预不同性别来源的A549、H1975肺腺癌细胞株，检测细胞株的增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学效应，并检测ERβ及其相关下游信号分子的表达和激活，明确雌激素对肺腺癌细胞效应的差异和机制。并在体内实验中通过构建裸鼠肺腺癌移植瘤模型验证所得到的结论。
　　结果：人肺腺癌组织芯片免疫组化染色提示女性肺腺癌组织中p-ERβ蛋白的表达要显著高于男性。女性来源的肺腺癌细胞系H1975所表现出的增殖、凋亡、侵袭、转移等肿瘤生物学效应较男性来源的肺腺癌细胞系A549更加明显。H1975中ERβ蛋白的表达明显高于A549；而且H1975中ER通路非基因途径的下游关键信号分子
　　MAPK、Akt的磷酸化程度的升高较A549更加明显；更重要的是，分别使用ERα、ERβ的特异性激动剂PPT、DPN模拟雌激素所产生的效应时发现，DPN能够重复之前所获得的H1975对雌激素的反应更加敏感这一系列结论，但是PPT却无法获得相似结论。雌激素对裸鼠肺腺癌移植瘤的成瘤效果有显著影响，注射雌激素组的肿瘤体积明显大于阴性对照组以及注射雌激素抑制剂组，雌激素抑制剂可以抑制移植瘤的生长，而雌激素促进移植瘤生长的这种效应在注射女性来源的H1975细胞系时更为显著。
　　结论：不同性别来源的肺腺癌细胞对雌激素存在反应性差异，雌激素能够更显著的刺激女性来源肺腺癌细胞系中ERβ的表达，并可能通过ERβ所介导的非基因途径产生效应，并在体内实验中证实雌激素对女性来源肺腺癌移植瘤的促进作用更加明显，肿瘤体积更大、生长速度更快。

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1前言

2材料和方法

2.1器材/试剂/抗体

2.2实验材料

2.3实验细胞的处理

2.4实验动物的处理

2.5组织芯片-免疫组织化学

2.6Western Blot

2.7EdU共孵育法检测细胞的增殖

2.8Transwell法检测细胞的侵袭与迁移

2.9 Annexin V/PI法检测细胞凋亡

2.10裸鼠移植瘤模型的处理

2.11统计分析

3结果

3.1 52例人肺腺癌组织芯片ER蛋白表达的性别差异

3.2体外实验中雌激素对不同性别来源肺腺癌细胞的效应差异

3.3体内实验中雌激素对不同性别来源肺腺癌细胞接种移植瘤的效应差异

4讨论

5参考文献

综述

5.参考文献

致谢