RNA干扰GSK-3β基因表达对Nogo-A抑制N2a细胞轴突生长的影响

摘要

Nogo-66可以组织中枢神经的轴突修复。但是，Nogo-66抑制神经突生长的作用机制还是未知。之前的研究结果发现蛋白激酶B（PKB）参与Nogo-66抑制轴突生长作用。糖原合成激酶3-β参与了神经系统的许多过程，包括分化、特异性、极性、可塑性和轴突生长。并且，GSK-3β是PKB最重要的下游分子之一。在本实验中，我们研究GSK-3β信号在Nogo-66处理的小鼠胶母N2a细胞中的作用。Nogo-66诱导N2a细胞GSK-3β Ser9位点磷酸化。第一部分，我们利用RNA干扰实验通过瞬时转染shRNA敲除GSK-3β在N2a细胞中的表达。与无RNAi细胞相比，shRNA细胞中，Nogo-66抑制轴突的作用得以减弱（P<0.05）。第二部分中用GSK-3β特异性阻滞剂SB216763预处理后，与单独使用Nogo-66相比可以缓解Nogo-66对轴突的抑制作用（P<0.05）。总之，这些结果提示GSK-3β参与了Nogo-66抑制N2a细胞轴突生长作用。

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绪论

实验材料与方法

一、 N2a细胞GSK-3? 水平测定

二、 神经突生长分析

实验结果

一、 Nogo-66降低N2a细胞GSK-3?磷酸化水平

二、 GSK-3?阻滞剂在Nogo-66抑制N2a细胞轴突生长中的作用

三、 讨论

参考文献

致谢