miR-224/141比值作为肾癌早期诊断生物标志物的潜能

摘要

[目的]肾癌目前早期诊断仍过度依赖影像学检查，缺乏简便、侵袭性小的早期诊断和预后随访的生物标志物。我们通过基因芯片检测肾透明细胞癌组织及相应癌旁组织中微小RNA表达谱的差异，然后用实时定量PCR在较大肾肿瘤组织中验证表达差异最明显的微小 RNA。进而挑选出有潜能作为肾透明细胞癌早期诊断及其治疗后随访的生物学标志物，
　　[方法]我们随机选取5对肾透明细胞癌患者（所有肿瘤直径均小于4cm）癌组织和相应癌旁组织，随后用miRNA microarray检测和分析微小RNA的表达，挑选出明显上调和下调的微小RNA，并用统计学方法统计癌组织和相应癌旁组织中微小RNA的差异表达。最后利用实时定量 PCR（qRT-PCR）进一步证实在较大肾肿瘤组织中微小RNA的差异表达。
　　[结果]按照倍数>2和p<0.05的标准,我们研究发现相比癌旁组织，在癌组织中异常表达的微小RNA有74个，其中在癌组织中表达明显下调的微小RNA有44个，下调最明显的是miR-141，在癌组织中表达明显上调的微小RNA有30个，上调最明显的微小RNA是miR-210和miR-224。我们尝试分析合用多个miRNA是否提高miRNA诊断ccRCC的准确性，我们推测：在肾癌中上调的miR-210和miR-224倍数越高，下调的miR-141差异越大，可能越有利于其鉴别ccRCC患者的癌组织和癌旁正常组织。因此我们建立 miR-210/141比值和 miR-224/141比值数学模型。惊奇的发现，miR-210/141诊断ccRCC的准确性提高为0.94（95％CI,0.898-0.985），敏感性为86.76%，特异性为98.53%；miR-224/141诊断 ccRCC的准确性提高为0.99（95% CI,0.977-1.000），敏感性为97.06%，特异性为98.53%。
　　[结论]在肾癌中，异常表达的微小RNA中下调最明显的是miR-141，上调最明显的是miR-210和miR-224。其中miR-224/141比值具有更大的潜能作为诊断ccRCC的分子生物标记物。

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引言

材料与方法

1.1主要实验试剂

1.2主要实验仪器和设备

1.3肾肿瘤患者组织标本收集

1.4芯片分析和检测类型

1.5．qRT-PCR检测肾肿瘤患者组织中miR-141的表达

结果

2.1 miRNA microarray检测和分析结果

2.2 实时定量PCR结果

附表图

讨论

参考文献

综述: 微小RNA和肾透明细胞癌的研究现状

附录

致谢