声明
英文缩略词
一、前言
1.1.肝星状细胞的活化与肝纤维化的发生发展
1.2.自噬
1.3.自噬在肝脏中的作用
2.1.Hif-1的结构及其表达的调节
2.2.Hif-1α的靶基因
2.3. Bnip3的结构
2.4. Bnip3的定位与细胞凋亡
2.5. Bnip3与自噬
本课题研究目的
二、材料与方法
1．主要实验仪器
2．实验材料
2.1 普通级BALB/c小鼠
2.2日本血吸虫阳性钉螺
2.3人肝星状细胞系LX-2
2.4 主要实验试剂
2.5抗体
2.6试剂配方
3．Western Blot
2.1收集蛋白样品
2.2按照上述分离胶和浓缩胶的配方进行配置SDS-PAGE凝胶
2.3 上样与电泳
2.4 转膜
2.5 封闭
2.6 一抗孵育和洗涤
2.7 二抗孵育和洗涤
2.8 蛋白条带检测
4．细胞培养、抑制剂处理、siRNA转染
5．免疫荧光
6.qPCR
7.免疫组化
8.统计分析
三、结果
1．LX-2 人肝星状细胞缺氧处理后和血吸虫肝纤维化小鼠的肝脏中 Bnip3 分子的表达升高
2．人肝星状细胞LX-2缺氧处理后发生自噬
3．抑制LX-2细胞中Hif-1α表达可减少Bnip3的表达
4．干扰LX-2细胞中Bnip3表达可阻抑LX-2细胞自噬发生并抑制细胞活化
5．小鼠原代肝星状细胞在体外自然活化过程中Bnip3的表达升高
6．原代肝星状细胞自然活化的过程中发生自噬且Hif-1α 的表达升高
7．抑制Hif-1α表达可阻遏自然活化的原代肝星状细胞内Bnip3表达增多
8.干扰原代肝星状细胞中Bnip3的表达影响肝星状细胞的活化和自噬的发生
四、讨论
1.HSC活化过程中伴随Hif-1α的升高
2.HSC活化伴随自噬发生
3.HSC活化伴随Bnip3增多，Bnip3参与对HSC自噬的调控
5.结果与展望
参考文献
五、综述:外泌体在病毒感染中的作用
1外泌体
2外泌体和病毒
3外泌体作为病毒疫苗
参考文献
致谢
附录1（攻读学位期间参加的学术讲座及发表的论文题目）
