声明
第一部分 肿瘤相关巨噬细胞诱导胆管癌细胞对吉西他滨化疗抵抗
1.1.前言
1.2.材料和方法
1.2.1.材料
1.2.2.方法
1.3.结果
1.3.1.流式细胞术检测巨噬细胞分型
1.3.2. qRT-PCR验证巨噬细胞诱导分化后相关标志物表达
1.3.3. M2-CM能够增强胆管癌细胞对于吉西他滨的化疗抵抗
1.3.4. M2-CM显著抑制吉西他滨诱导的胆管癌细胞凋亡
1.4.讨论
第二部分 aPKCι/NF-κB信号通路介导肿瘤相关巨噬细胞诱导胆管癌细胞耐药
2.1.前言
2.2.材料和方法
2.2.1.材料
2.2.2.方法
2.3.结果
2.3.1. aPKCι可诱导NF-κB磷酸化及入核活化
2.3.2. aPKCι可促进胆管癌细胞转化生长,而NF-κB抑制剂可逆转此效应
2.3.3. TAM通过诱导aPKCι/NF-κB信号通路活化促进胆管癌吉西他滨耐药
2.3.4.胆管癌细胞中aPKCι和P62存在相互作用关系
2.3.5.胆管癌细胞中aPKCι和P62通过PB1结构域结合,并促进NF-κB信号通路活化
2.4.讨论
第三部分 aPKCι/NF-κB信号通路介导肿瘤相关巨噬细胞诱导的胆管癌细胞上皮间质转化
3.1.前言
3.2.材料和方法
3.2.1.材料
3.2.2.方法
3.3.结果
3.3.1. M2巨噬细胞表达和分泌TGFβ1
3.3.2. TGFβ1可诱导NF-κB信号激活
3.3.3. TAM通过分泌TGFβ1诱导胆管癌细胞增殖
3.3.4. TAM通过分泌TGFβ1诱导胆管癌aPKCι/NF-κB信号通路活化
3.3.5. TAM通过分泌TGFβ1诱导aPKCι/NF-κB信号通路活化促进胆管癌EMT
3.3.6.体内 TAM 通过诱导 aPKCι/NF-κB 信号通路活化促进胆管癌增殖转移
3.4.讨论
第四部分 aPKCι介导的胆管癌间质表型细胞分泌CCL5招募并诱导巨噬细胞M2型极化
4.1.前言
4.2.材料和方法
4.2.1.材料
4.2.2.方法
4.3.结果
4.3.1. aPKCι诱导胆管癌上皮间质转化促进CCL5分泌
4.3.2. aPKCι通过NF-κB信号通路促进CCL5分泌
4.3.3.胆管癌细胞aPKCι/NF-κB信号通路活化促进CCL5的分泌以招募单核细胞
4.3.4. aPKCι/NF-κB信号通路介导胆管癌细胞分泌 CCL5诱导巨噬细胞 M2极化
4.3.5. aPKCι介导胆管癌分泌CCL5通过招募巨噬细胞促进肿瘤生长
4.4.讨论
第五部分 纳米脂质体联合输运aPKCι-siRNA和吉西他滨对胆管癌治疗疗效研究
5.1.前言
5.2.材料和方法
5.2.1.材料
5.2.2.方法
5.3.结果
5.3.1.纳米脂质体主要表征
5.3.2.锚定非依赖实验检测相应脂质体药物对胆管癌转化生长的影响
5.3.3.皮下成瘤模型验证相应脂质体药物抗肿瘤效应
5.3.4. Gemcitabine-aPKCι-siRNA-L结构及抗肿瘤示意图
5.4.讨论
全文总结
全文总结示意图
参考文献
综述:胆管癌免疫微环境研究进展
附录1 攻读学位期间发表学术论文目录
附录2 缩略词汇
致谢