声明
1 绪论
1.1 细胞自噬简介
1.1.1 细胞自噬的分类
1.1.2 自噬的基本过程
1.2 ESCRT复合物的基本功能
1.3 自噬发生过程中的生物膜裂变过程
1.4 ESCRT复合物和细胞自噬
1.5 课题研究的目的、意义和内容
1.5.1 课题研究的目的和意义
1.5.2 课题研究的内容
2 实验材料和方法
2.1 实验材料
2.1.1 质粒及构建所用试剂
2.1.2 常用生化试剂
2.1.3 酿酒酵母菌株
2.1.4 液体培养基
2.1.5 实验仪器
2.2 实验方法
2.2.1 目的基因提取
2.2.2 质粒构建
2.2.3 原核蛋白的表达与纯化
2.2.4 GST（glutathioneS-transferase）pull-down实验
2.2.5 酵母转化
2.2.6 自噬相关蛋白体内荧光共定位探究
2.2.7 荧光寿命成像
2.2.8 GFP-Atg8降解实验
3 结果与分析
3.1 Snf7，Vps20和Atg8基因序列的获取
3.2 Snf7定位于自噬体并参与细胞自噬过程
3.3 ESCRT-Ⅲ复合物组分Vps20不参与自噬过程
3.4 Snf7与Atg8存在相互作用
3.4.1 FLIM-FRET检测Snf7与Atg8的相互作用
3.4.2 Snf7和Atg8蛋白性质表征
3.4.3 GST pull-down检测Snf7与Atg8的相互作用
4 总结与讨论
致谢
参考文献
附录 本文所用到的主要缩略语及全称
