声明
全文缩写词
第一部分 氟暴露、突触结合蛋白10基因启动子区甲基化与儿童智力的关系
前言
1材料和方法
1.1试剂和仪器
1.2 人群选择
1.3 伦理学审查
1.4 问卷调查及体检
1.5 样本采集
1.6 智力检测
1.7 氟离子浓度检测
1.8 DNA提取
1.9 Human Methyl-Seq法筛选甲基化差异基因
1.10定量甲基化特异性PCR（quantitative methylation specific PCR， QMSP）法检测突触结合蛋白10（synaptotagmin 10，Syt10）基因启动子区甲基化水平
1.11 统计学方法
2结果
2.1人群基本信息
2.2 氟暴露相关甲基化差异基因筛选
2.3 人群验证
2.4 氟暴露与儿童智力的关系
2.5 Syt10基因启动子区甲基化水平和儿童智力的关系
2.6 Syt10基因启动子区甲基化在氟暴露致儿童智力损失中的作用
3讨论
第二部分 Syt10基因启动子区甲基化、基因表达水平与氟神经毒性关系
前言
1材料和方法
1.1试剂和仪器
1.2试剂配制
1.3实验对象及处理
1.4 Morris水迷宫实验
1.5 大鼠海马组织及PC12细胞中DNA和RNA的提取
1.6 RNA逆转录
1.7Real-time RT-PCR检测Syt10 mRNA表达
1.8 目标区域甲基化测序法（MethylTargetTM-Seq）
1.9 蛋白提取、定量及变性
1.10Western blot法检测Syt10蛋白表达量
1.11 石蜡包埋
1.12 尼氏染色
1.13 免疫组化
1.14 激光扫描共聚焦
1.15 CCK8检测细胞存活率
1.16 统计学方法
2结果
2.1 NaF的神经毒性作用
2.2 NaF对子代2月SD大鼠海马组织及PC12细胞Syt10基因启动子区DNA甲基化水平的影响
2.3 NaF对大鼠Syt10基因转录水平的影响
2.4 NaF染毒对大鼠海马组织和PC12细胞Syt10蛋白表达水平的影响
2.5 NaF染毒对大鼠海马组织中Syt10蛋白定位的影响
2.6 NaF染毒对PC12细胞中Syt10蛋白定位的影响
2.7 透射电镜观察大鼠海马神经细胞中突触囊泡数目
3讨论
结论
创新点与局限性
参考文献
综述:DNA甲基化与神经退行性疾病的关系
附录
致谢
