百合知母汤的抗抑郁作用及其ERK½、CaMK信号通路机制

摘要

目的：
　　研究百合知母汤的抗抑郁作用、探索其抗抑郁的ERK1/2和CaMK信号通路机制。为进一步研究及临床应用提供参考。
　　方法：
　　①分组：选用SD雄性大鼠50只，按照体重随机分为正常组、模型组、氟西汀组、百合知母汤中剂量组和百合知母汤高剂量组，每组10只；
　　②造模：除正常组外，其余各组运用慢性轻度不可预见性刺激结合孤养（CUMS）的方法制造抑郁症模型，共计49d；
　　③实验于第22d开始灌胃治疗，正常对照组、模型组给予生理盐水、其余各组分别灌胃给予氟西汀（1.8mg·kg-1）、百合知母汤（1.5g·kg-1、3.0g·kg-1），共计28d；
　　④行为学测定：各组大鼠体重变化率、1％蔗糖水消耗率、敞箱实验总得分、Morris水迷宫实验及悬尾试验；
　　⑤尼氏染色：尼氏染色观察各组大鼠海马CA区神经元变化；
　　⑥分子生物学指标测定：分别用免疫组化法、免疫印迹法、RT-PCR法检检测海马内TrKB/ERK?、CaM/CaMKⅡ、CREB/BDNF mRNA的表达。
　　结果：
　　①行为学：与模型组比较，百合知母汤治疗4w后，百合知母汤中、高剂量组大鼠的体重增长率、1%蔗糖水消耗率、敞箱实验总得分、Morris水迷宫实验中120s内穿越平台次、在平台区域总时间和总路程在数均显著提高；Morris水迷宫实验中潜伏期、悬尾实验中5min内的绝望时间缩短，差异具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。
　　②尼氏染色：模型组大鼠海马CA区锥体细胞数量减少（部分消失或溶解）、间质水肿疏松、中断、紊乱，并可见凋亡小体，高倍显微镜下可见神经元胞膜溶解、破裂、尼氏小体减少；百合知母汤高、中剂量组与模型组比较，细胞数量增加，排列更整齐、紧凑，间质水肿改善，尼氏小体增加。
　　③分子生物学检测：与模型组比较，百合知母汤中、高剂量组海马组织中TrKB/ERK1/2、CaM/CaMKⅡ蛋白、CREB/BDNF的mRNA表达量均上调，差异具有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。
　　结论：
　　①百合知母汤可显著改善大鼠的抑郁样行为改变；
　　②百合知母汤可改善抑郁症大鼠海马CA区神经元病理性改变，可促进大鼠海马神经元的修复与再生；
　　③百合知母汤可能通过激活 ERK1/2和CaMK信号转导通路调节大鼠海马神经元再生，从而发挥抗抑郁作用。

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前言

第一章 百合知母汤对模型大鼠行为学及海马病理结构的影响

1 材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3 统计学处理

2 实验结果

2.1各组大鼠质量增长率的结果

2.2各组大鼠糖水消耗率的结果

2.3各组大鼠敞箱实验总得分结果

2.4各组大鼠Morris水迷宫实验的结果

2.5各组大鼠悬尾实验得分的结果

2.6各组大鼠大脑尼氏染色的结果

3 讨论

3.1 CUMS模型的复制

3.2行为学指标的选择

3.3大鼠海马与抑郁症

第二章 百合知母汤对CUMS大鼠海马CaMK通路的影响

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3数据处理

2 结果

2.1 各组大鼠CaM、CaMKⅡ蛋白含量的比较

2.2 RT-PCR检测大鼠海马组织CREB、BDNFmRNA的表达量

3 讨论

3.1 CREB、BDNF可促进海马神经元再生

3.2百合知母汤抗抑郁的CaMK信号转导通路机制

第三章 百合知母汤对CUMS大鼠海马ERK?通路的影响

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

1.3数据处理

2. 结果

2.1免疫组化检测海马ER?的表达

2.2各组大鼠海马TrkB的表达

3讨论

第四章 总结与展望

1. 总结

2.本次研究的创新点：

3.问题与展望

参考文献

综述: 中药抗抑郁信号转导机制的研究进展

致谢