用于肿瘤逆转的新型可注射生物活性水凝胶材料的研究

摘要

胚胎组织的微环境可通过表遗传学机制使肿瘤细胞逆向转化为表型正常的细胞,这一过程主要是通过抑制肿瘤细胞中不受调控的nodal信号蛋白的过度表达实现的。针对这样的发现,有研究者提出在体外模拟该系统用于肿瘤治疗的研究设想。为此,本研究采用胚胎细胞外基质的主要成分透明质酸为基本材料,将透明质酸和IV型胶原中的活性肽段通过化学交联的方法设计成可注射的水凝胶,来模拟胚胎发育的物理微环境,并将nodal受体cripto-1的封闭抗体接枝到水凝胶的骨架上,来模拟胚胎发育中逆转肿瘤的生物学微环境。
　　通过对水凝胶材料流变学、孔隙率、显微形貌的研究及肿瘤细胞三维培养后显微形貌的观察,该水凝胶系统能够作为体外肿瘤逆转研究的理想支架材料。我们选用人乳腺癌细胞系MCF-7细胞系作为快速增殖而不具有侵袭性代表,MDA-MB-231乳腺肿瘤细胞系作为侵袭和转移性肿瘤细胞的代表。体外检测该水凝胶系统对乳腺癌细胞恶性表型的影响。体外实验结果表明,水凝胶系统能有效逆转肿瘤细胞的恶性表型,促进线粒体膜电位下降、细胞凋亡,降低细胞的侵袭性。利用小动物活体成像技术对于凝胶的体内降解进行了研究,表明该凝胶在体内的降解持续10天。分别利用黑色素肿瘤细胞B16和MDA-MB-231制备了荷瘤鼠模型,并对水凝胶系用于荷瘤鼠肿瘤模型肿瘤逆转治疗的有效性进行研究。液态凝胶可以注射到肿瘤部位,并在瘤体内固化形成不溶的胶体,局部形成逆转肿瘤的微环境。研究结果表明:该水凝胶系统能显著减小MDA-MB-231肿瘤的体积,并在注射后38天,实验组部分小鼠瘤体消失;并有效抑制恶性程度高的B16肿瘤的生长。本课题研制出一种新型的生物活性水凝胶材料用于肿瘤的逆向转化治疗,为肿瘤的治疗开辟了新的途径。

目录

摘 要

Abstract

第 1 章 绪 论

1.1 课题来源

1.2国内外在该方向的研究现状及分析

1.3采用水凝胶模拟胚胎发育微环境用于肿瘤细胞逆转的研究

1.4 本课题的主要研究内容

第2章 实验材料和方法

2.1 材料

2.2 实验方法

2.3本章小结

第 3 章 HA水凝胶系统的构建

3.1引言

3.2 HA-ADH水凝胶材料的合成

3.3水凝胶理化性能的研究

3.4讨论：

3.5本章小结

第4章 水凝胶系统用于肿瘤逆转的体外研究

4.1引言

4.2类实体瘤模型构建

4.3不同力学性能的水凝胶对类实体瘤细胞凋亡的影响的研究

4.4活性多肽及单克隆抗体的合成

4.5水凝胶复合生物活性分子构建生物活性水凝胶对类实体瘤体外逆转的研究

4.6讨论

4.7本章小结

第5章 水凝胶系统用于肿瘤逆转的体内研究

5.1引言

5.2水凝胶体内降解的研究

5.3 荷瘤鼠模型制备

5.4 生物活性水凝胶用于人乳腺癌荷瘤鼠模型肿瘤治疗的有效性研究

5.5 生物活性水凝胶系统用于鼠黑色素瘤荷瘤鼠肿瘤治疗的有效性研究

5.6讨论

5.7本章小结

结 论

展 望

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文

哈尔滨工业大学硕士学位论文原创性声明

致 谢