复方白花前胡液抗大鼠脑缺血再灌注损伤的相关实验研究

摘要

缺血性脑卒中以其高发病率、死亡率、致残率严重危害人类健康,已成为当代人类三大疾病死亡原因之一.缺血性脑卒中是脑血管病危急重症之一,急性期起病急骤,此期救治对提高抢救成功率和病后生存质量具有重要意义[1].缺血性脑卒中后梗塞灶周围水肿压迫脑组织导致循环血流下降形成梗死灶周围缺血半暗带.凋亡是缺血半暗带神经细胞死亡的主要形式,抑制神经细胞凋亡可以减轻缺血半暗带的损伤,挽救濒死神经细胞,改善缺血性卒中预后.因此,如何减轻脑梗死后神经细胞凋亡的发生发展是脑血管病研究中的重点和难点所在.中医认为中风病的基本病机为本虚标实,病位在脑.缺血性脑卒中发生的主要病因病机在于患者平素气血亏虚,心、肝、肾三脏阴阳失调,加之忧思恼怒,或外邪侵袭等诱因,导致气血运行受阻,肌肤筋脉失于濡养,或阴亏于下,阳盛于上,蒙蔽清窍,阴阳不相维系所致.吾师涂晋文教授强调缺血性脑卒中的根本病机为因虚致瘀,其病理环节是正气耗损,脑脉瘀滞,其病位在脑,病性为本虚标实.虚者,是气血、津液、精髓之不足;瘀者,乃血瘀、痰浊之类.因此,拟定了益气活血、化痰通络的中药复方白花前胡液,以神经细胞凋亡为切入点,通过在体和体外细胞培养实验,以整体器官功能,病理组织改变及细胞和分子生物等三个层次系统,研究复方白花前胡液的脑保护作用及其可能机制.第一部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损及组织病理学改变的影响采用线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,设立假手术组、模型组、复方白花前胡液大、中、小剂量治疗组,造模动物清醒后即刻给药,于第3日观察各项指标.第二部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响大鼠脑组织石蜡切片采用原位末端标记(TUNEL)法检测神经细胞凋亡.第三部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白水平的影响大鼠脑组织石蜡切片采用免疫组化染色法检测凋亡调控基因bcl-2,bax、Caspase-3的蛋白水平.第四部分复方白花前胡液对拟缺血诱导的神经细胞凋亡及其机制研究培养的海马神经细胞,分为正常组、模型组、复方白花前胡液大、中剂量组、尼莫地平对照组,采用缺氧罐(通入95％N<,2>和5%CO<,2>的混合气体)和无糖Earle's液进行缺氧/缺糖处理3h,再复氧复糖24h后,显微镜观察细胞形态,荧光染色法流式细胞仪检测细胞凋亡率,并分别检测乳酸脱氢酶含量及细胞游离钙的含量.

目录

第一部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损及组织病理学改变的影响

第二部分复方白花前胡液对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

第三部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白水平的影响

第四部分复方白花前胡液对拟缺血诱导的神经细胞凋亡及其机制研究

Abstract

英文缩略词表

前言

文献回顾

第一部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损及组织病理学改变的影响

材料与方法

结果

讨论

第二部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响

材料与方法

结果

讨论

第三部分复方白花前胡液对脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白水平的影响

材料与方法

结果

讨论

第四部分复方白花前胡液对拟缺血诱导的神经细胞凋亡及其机制研究

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 脑缺血的病理生理学机制的研究进展

参考文献

附图

致谢